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冠心病患者MPO/PON1与HDL功能关系的临床与基础研究

黄水英  
【摘要】:目的:分析急性心肌梗死(AMI)患者和非冠心病(CHD)患者血浆中髓过氧化物酶(MPO)及对氧磷酶-1(PON1)的变化,再利用不同组血清干预THP-1源性巨噬细胞,通过测定胆固醇流出率、ABCA1、ABCG1蛋白和mRNA的表达来反应HDL-C的功能变化,测定IL-6及TNF-α的水平来反应不同血清作用后巨噬细胞内的炎症状态,探讨冠心病患者MPO/PON1与HDL功能关系及槲皮素对HDL功能的保护作用。方法:1.临床研究部分:(1)分别选取150名AMI和非CHD住院患者,收集基本临床资料和生化指标。(2)收集两组患者空腹静脉血,分别离心获取血清和血浆,ELISA法测定血浆中MPO和PON1的水平。2.体外研究部分:(1)培养人单核细胞(THP-1),并诱导为巨噬细胞。(2)分别用来源于AMI和非CHD患者apoB缺乏的血清干预实验,将实验分为四组:实验组(AMI患者血清干预)、Que组(AMI患者血清+槲皮素干预)、对照组(非CHD患者血清干预)、空白组(不加任何干预),分别测定并计算胆固醇流出率、用Western-blot和PCR测定胆固醇逆转运(RCT)途中相关转运蛋白ABCA1和ABCG1蛋白和mRNA的表达、ELISA测定炎症因子TNF-α、IL-6的水平。结果:1.AMI组临床资料与非CHD组比较,年龄、性别、高血压、糖尿病、吸烟及心血管家族史均有统计学差异(P0.01),AMI组患者年龄较非CHD组偏大,且性别以男性为主,饮酒史两者虽有差异,但无统计学意义。2.两组各血液指标相比较,AMI组TG、TC、LDL-C、apoB、hs-CRP均高于非CHD组,HDL-C、apoA、apoA/apoB均低于非CHD组,差异均有统计学意义(P0.01),同时,两组血型构成比间的差异也具有统计学意义(P0.01)。3.AMI组hs-CRP与HDL无直线相关性,而非CHD组hs-CRP与HDL呈负相关,且相关系数r=-0.791。4.AMI组血浆中MPO水平明显高于非CHD组,PON1则明显低于非CHD组,两者比值MPO/PON1为AMI组大于非CHD组,差异均具有显著统计学意义(P0.001)。5.AMI组MPO/PON1与HDL-C无直线相关性。6.实验组、Que组、对照组及空白组胆固醇流出率间的差异均有统计学意义(P0.01);与对照组相比,实验组和Que组胆固醇流出率均减低(P0.01);与实验组比较,Que组胆固醇流出率明显升高(P0.01);与空白组相比,实验组和Que组胆固醇流出率显著升高(P0.01)。7.与对照组相比较,实验组、Que组ABCA1和ABCG1的蛋白表达均下降(P0.01);与空白组对比,实验组、Que组ABCA1和ABCG1的蛋白表达均升高(P0.05);与实验组比较,Que组ABCA1的蛋白表达增加(P0.05),ABCG1的蛋白表达降低不明显,且无统计学意义(P0.05);各组间采用单因素方差分析进行比较,差异有统计学意义(P0.05)。8.与对照组相比较,实验组、Que组ABCA1和ABCG1mRNA的表达明显下降(P_(ABCA1)0.01,P_(ABCG1)0.05);与实验组比较,Que组ABCA1和ABCG1mRNA的表达均增加(P0.05);与空白组对比,实验组ABCA1 mRNA的表达增多不明显,无统计学意义(P0.05),ABCG1 mRNA的表达增多有统计学意义(P0.05);各组间比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。9.四组间IL-6、TNF-α水平的差异均有统计学意义(P0.001);与对照组相比,实验组、Que组IL-6、TNF-α水平均升高(P_(IL-6)0.05、P_(TNF-α)0.01);与实验组比较,Que组IL-6、TNF-α水平下降(P_(IL-6)0.05、P_(TNF-α)0.01);与空白组比较,实验组、Que组的IL-6、TNF-α水平均显著升高(P_(IL-6)0.05、P_(TNF-α)0.01)。结论:1.AMI患者的HDL功能发生了改变,胆固醇流出率、RCT相关的转运蛋白ABCA1及ABCG1的表达均下降,这些变化可能与冠心病的发生有密切关系。2.不同比值的MPO/PON1培养细胞后,HDL的胆固醇逆转运功能发生了改变,因此,MPO/PON1水平可能间接反映HDL的胆固醇逆转运功能。3.槲皮素可以改善胆固醇的逆转运功能和巨噬细胞内的炎症反应,具体机制尚需进一步研究。


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