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SBHFRT和CFRT技术对NSCLC组织中淋巴细胞和细胞因子影响的初步探讨

岳宏程  
【摘要】:目的:肺癌是当前最常见的恶性肿瘤,放疗是肺癌重要的治疗方式。放疗除直接杀死肿瘤细胞外,还可以激发机体的抗肿瘤免疫反应,促进抗肿瘤淋巴细胞和具有免疫刺激作用的细胞因子向肿瘤组织浸润,从而改善肿瘤微环境,使肿瘤对免疫系统的攻击更为敏感,增强肿瘤的治疗效果。近距离放疗(brachytherapy)在肺癌的治疗中应用得越来越广泛,但其对肺癌肿瘤组织中淋巴细胞和细胞因子的影响目前并不清楚,本文旨在探讨单次近距离大分割放疗(single brachytherapy hypofractionated radiotherapy,SBHFRT)和常规分割放疗(conventional fractionation radiotherapy,CFRT)对肺癌肿瘤组织中淋巴细胞和细胞因子浸润的影响及意义。方法:将Lewis细胞接种在C57BL/6小鼠右侧后腿上,建立非小细胞肺癌移植瘤模型,随机分为空白对照组(Control),常规分割放疗组(CFRT)和单次近距离大分割放疗组(SBHFRT),分别给予相应处理。记录肿瘤终体积和肿瘤生长抑制率(tumor growth inhibition rate,TGIR),并于放疗结束后第7天,第14天两个时间点于光学显微镜下观察各组肿瘤的坏死情况,应用切片扫描仪和图像分析系统计算肿瘤坏死率。采用流式细胞学法检测各组肿瘤细胞凋亡率。免疫组织化学法检测各组肿瘤组织内CD86、CD4、CD8、FoxP3细胞的数量以及肿瘤细胞Ki-67的表达。酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组肿瘤组织内白细胞介素10(interleukin-10,IL-10),白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)和干扰素γ(interferon-γ,INF-γ)的含量。18F-FDG microPET-CT检测各组肿瘤最大标准摄取值(maximum standardized uptake value,SUV_(max))评估肿瘤代谢谢活性。结果:实验研究结果显示,经过26天肿瘤体积观察,SBHFRT组肿瘤终体积明显小于CFRT组和Control组(P0.05)。放疗结束后第7天和第14天,SBHFRT组肿瘤坏死率和肿瘤细胞凋亡率均较CFRT组和Control组高(P0.05),而Ki-67表达率均较CFRT组和Control组低(P0.05)。放疗结束后第7天,SBHFRT组肿瘤组织中CD86、CD4、CD8细胞较CFRT组和Control组增加(P0.05),而FoxP3细胞较CFRT组和Control组减少(P0.05)。放疗结束后第14天,SBHFRT组肿瘤组织中CD86、CD4、CD8细胞较CFRT组和Control组增加(P0.05),而FoxP3细胞较CFRT组和Control组减少(P0.05)。放疗结束后第14天,SBHFRT组肿瘤组织中CD4、CD8细胞较该组第7天时减少(P0.05)。放疗结束后第7天,SBHFRT组肿瘤组织中IL-12、INF-γ含量较CFRT组和Control组增加(P0.05),而IL-10含量较CFRT组和Control组减少(P0.05)。放疗结束后第14天,SBHFRT组肿瘤组织中IL-12、INF-γ含量较CFRT组和Control组增加(P0.05),而IL-10含量较CFRT组和Control组减少(P0.05)。放疗结束后第14天,SBHFRT组肿瘤组织中IL-12、INF-γ含量较该组第7天时减少(P0.05)。放疗结束后第7天,SBHFRT组肿瘤SUV_(max)值较CFRT组和Control组低(P0.05)。放疗结束后第14天,SBHFRT组肿瘤SUV_(max)值较CFRT组和Control组低(P0.05)。放疗后第14天,SBHFRT组肿瘤SUV_(max)值较该组第7天时增加(P0.05)。结论:1、NSCLC肿瘤组织中免疫相关淋巴细胞和细胞因子的浸润与放疗技术和剂量有关。SBHFRT组免疫相关淋巴细胞和细胞因子浸润明显高于CFRT组,前一种放疗技术更有可能改善NSCLC肿瘤组织内免疫微环境。2、NSCLC采用SBHFRT导致的肿瘤细胞坏死和凋亡明显高于CFRT,对肿瘤细胞增殖的抑制作用也明显优于CFRT。3、SBHFRT技术照射NSCLC导致肿瘤组织中免疫相关淋巴细胞和细胞因子浸润增加,可能与SBHFRT导致肿瘤细胞大量坏死和凋亡,肿瘤细胞增殖受到抑制有关。


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