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胞内Ca~(2+)释放在IP_3激动剂UTP调控猪冠脉平滑肌细胞STOCs中的作用

李鹏云  
【摘要】:目的:大电导钙激活钾通道(BKCa通道)是血管平滑肌舒缩调控机制中的重要靶点。平滑肌细胞肌浆网上三磷酸肌醇受体(inositol1,4,5-trisphosphate receptors,IP3Rs)和兰诺定受体(ryanodine receptors,RyRs)介导的Ca2+释放可引起细胞内局部[Ca2+]显著增加,激活邻近胞膜上BKCa通道的开放产生自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outwardcurrents,STOCs),进而引起细胞膜超极化,电压依赖性Ca2+内流减少,负反馈调节平滑肌的收缩。目前多数研究已经证实在血管平滑肌,RyRs介导的Ca2+释放与BKCa通道之间的耦联对于血管舒缩活性的调控具有重要意义,而三磷酸肌醇(inositol 1,4,5-trisphosphate,IP3)作为一种重要的胞内第二信使,其调控血管平滑肌BKCa通道的机制还存在较多争论。前期研究已证实了IP3对猪冠状动脉平滑肌细胞BKCa的单通道活性具有激活作用,但其对于全细胞构型时BKCa通道的调控机制目前尚不清楚。由于IP3极易降解不稳定,且目前国内外缺乏可透膜的IP3衍生物,本实验拟采用IP3的前体物质尿嘧啶三磷酸(uridine 5'-triphosphate,UTP)作为IP3替代物,研究其对于急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞STOCs的作用,探讨IP3对全细胞构型时BKCa通道的作用机制,为下一步结合激光扫描共聚焦显微成像技术研究细胞内Ca2+信号的动力学与STOCs之间的相关性奠定基础。方法:


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