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当归饮子加减方对慢性荨麻疹抗过敏作用及机理研究

郭静  
【摘要】:目的:运用当归饮子加减方干预荨麻疹慢性期动物气血两虚症模型,观察养血活血通络法预防荨麻疹复发的作用,并探讨其抗过敏机制,为养血活血通络法的应用以防治慢性皮肤病复发提供科学依据。 方法:采用腹侧皮下注射0.3m1·kg-1利血平生理盐水溶液和皮下注射2%乙酰苯肼制作动物气血两虚模型。气血两虚模型制作成功后,结合Ⅰ-Ⅳ型变态反应模拟慢性荨麻疹发病,以KM小鼠或SD大鼠为受试对象,按体重随机分为空白组、模型组、氯雷他定组、玉屏风组、祛风止痒口服液组、当归饮子高、中、低剂量组分别研究:(1)尾静脉注射1%卵清蛋白合卡介菌疫苗稀释剂致大鼠被动皮肤过敏反应,测定每组动物蓝斑直径、蓝斑光密度(OD)及蓝斑抑制率,分析当归饮子加减方对大鼠被动皮肤过敏的影响。(2)小鼠背部皮下注射组胺,尾静脉注射1%伊文思兰生理盐水溶液,通过测定蓝斑光密度及蓝斑抑制率,分析当归饮子加减方对小鼠毛细血管通透性的影响。(3)尾静脉注射1%卵蛋白生理盐水溶液致大鼠肥大细胞脱颗粒反应,测定各组动物颅顶皮下组织肥大细胞脱颗粒及其抑制率,并对肥大细胞形态进行显微分析,分析当归饮子加减方对大鼠肥大细胞脱颗粒的影响。(4)尾静脉注射低分子右旋糖酐致小鼠全身瘙瘁,记录注射后30min内小鼠搔抓潜伏期、搔抓次数和瘙痒持续总时间,计算瘙痒抑制率;搔抓反应结束后,采用Elisa法测定每只动物血清组胺水平,分析当归饮子加减方对低分子右旋糖酐致小鼠全身瘙瘁的影响。(5)采用DNCB致小鼠耳廓超敏反应,测定每组动物耳廓肿胀度及其抑制率,分析当归饮子加减方对小鼠迟发型变态反应的影响。(6)采用卵蛋白+氢氧化铝合百日咳疫苗致小鼠变态反应,光镜计数外周血嗜酸性粒细胞(EOS)变化;采用Elisa法测试血清IgE水平;免疫组织化学检测血管壁组织中IL-4、IFN-γ表达量;RT-PCR检测血管壁组织IL-4mRNA、IFN-γ mRNA表达情况;血管壁组织的病理切片显微镜检测,研究当归饮子对慢性荨麻疹治疗作用机理。实验数据用SPSS18.0统计软件进行统计分析。计量数据均用(x±s)表示,组间比较用Dunnett t检验;计数资料用X2检验。 结果:当归饮子加减方可显著减小大鼠被动皮肤过敏蓝斑直径(P0.01),降低蓝斑光密度吸收值(P0.01);显著抑制组胺致小鼠毛细血管通透性增高(P0.01);显著抑制大鼠肥大细胞脱颗粒(P0.01);显著延长低分子右旋糖酐致小鼠瘙痒搔抓潜伏期(P0.01),减少小鼠搔抓次数(P0.01),缩短搔抓持续时间(P0.01),降低动物血清组胺水平(P0.01);显著对抗DNCB致小鼠迟发型耳廓变态炎症反应(P0.01);显著降低致敏动物外周血嗜酸性粒细胞数量(P0.01),降低动物血清IgE水平(P0.01),降低致敏动物血管壁组织IL-4水平(P0.01),升高IFN-γ(P0.01)水平,下调致敏动物血管壁组织IL-4mRNA(P0.01)表达,升高IFN-γ mRNA表达(P0.01),显著降低荨麻疹动物血管壁组织水肿、淋巴滤泡增生及炎细胞浸润。且效果显著优于同等剂量的玉屏风口服液(P0.05)和祛风止痒口服液(P0.05); 结论:当归饮子加减方可显著干预荨麻疹慢性期动物气血两虚症模型,主要表现在:当归饮子加减方可显著对抗气血两虚证动物变态反应,能有效抵抗大鼠被动皮肤过敏、肥大细胞脱颗粒;有效抑制小鼠毛细血管通透性、耳廓肿胀及低分子右旋糖酐致全身瘙痒反应;显著减少致敏动物外周血嗜酸性粒细胞数量,降低动物血清IgE水平,下调致敏动物血管壁组织IL-4水平,升高IFN-γ水平,下调致敏动物血管壁组织IL-4mRNA表达,升高IFN-γ mRNA表达,对气血两虚型慢性荨麻疹具有显著对抗作用。


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