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川产道地药材叠鞘石斛与四种石斛的对比研究

石媛慧  
【摘要】:石斛属(Dendrobium)是兰科(Orchidaceae)植物中第二大属。叠鞘石斛D. aurantiacum Rchb.f.var.denneanum (Kerr) Z.H.Tsi是兰科石斛属石斛组线叶石斛D. Aurantiacum Rchb的变种。石斛在四川省内自产自销,其中以金钗石斛、叠鞘石斛为主流品种,而尤以叠鞘石斛分布最为广泛。叠鞘石斛首载于《神农本草经》,列为上品,具有滋阴清热、益胃生津,润肺止咳等功效。现代药理学研究证明石斛具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、降低血糖等作用,其主要化学成分有石斛主要含有生物碱类、联苄类、菲类、氨基酸、倍半萜类、多糖类等。 目的: 本课题为科技部“十二五”支撑项目:石斛规范化种植基地及其SOP优化、升级研究(2011BAI13B02-8),以叠鞘石斛为重点研究对象,选取同属四种石斛(肿节石斛、反瓣石斛、翅萼石斛和翅梗石斛)进行对比研究,采用薄层色谱法、紫外-可见分光光度法、HPLC-DAD-ELSD、GC-MS联用等现代分析技术,以期增强其临床用药准确并扩大其应用范围及适应面,从而增加叠鞘石斛的的产业价值。同时对叠鞘石斛化学成分进行分离纯化,寻找合适的指标性成分建立叠鞘石斛的含量测定方法。 方法: 1.薄层色谱鉴别:参照《中国药典》薄层鉴别方法,对五种石斛药材不同极性部位(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)薄层色谱进行系统研究。 2.采用HPLC-DAD-ELSD联用技术对五种石斛药材指纹图谱进行对比研究。 3.采用苯酚-硫酸法,以无水葡萄糖为对照,对五种石斛多糖含量进行比较。 4.采用GC-MS联用技术对五种石斛药材脂溶性成分以及游离糖进行对比研究。 5.采用正相硅胶、MCI、Sephadex LH-20、制备薄层、重结晶等方式对叠鞘石斛乙酸乙酯部分进行分离纯化,并采用高效液相色谱法建立分离出的化合物的含量测定方法。 结果: 1.叠鞘石斛、肿节石斛、反瓣石斛、翅萼石斛和翅梗石斛均为石斛属,但其内在的化学成分无论在种类还是含量上都存在差异。 2.分离叠鞘石斛乙酸乙酯部位得到了7个化合物,运用光谱及化学的方法鉴定了化合物的结构,目前已鉴定了7个化合物,分别为(1)2-O-β-D-吡喃葡萄糖基顺式肉桂酸,(2)2-O-β-D-吡喃葡萄糖基反式肉桂酸,(3)柚皮苷元,(4)琥珀酸,(5) Moscatin,(6) Melilotoside methyl ester,(7)杓唇石斛素,其中(6)Melilotoside methyl ester首次从叠鞘石斛中分离。 3.首次采用高效液相色谱法建立了叠鞘石斛中Moscatin的含量测定方法,并测定了叠鞘石斛中Moscatin的含量。 结论: 五种石斛同属于石斛属植物,但所属组不同,其化学成分有所区别但也有相同的化学成分存在,反映了它们之间的生物亲缘关系。我们对叠鞘石斛乙酸乙酯部位进行化学成分研究,为更好地控制叠鞘石斛的质量和化学成分的研究提供相关依据。


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