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芪白颗粒制备工艺、质量标准以及主要药效学研究

李晓荣  
【摘要】:芪白颗粒是由黄芪、白术、黄芩、女贞子、墨旱莲、鸡血藤、薏苡仁、菟丝子、茯苓、天花粉、三七以及甘草等十二味中药组成的复方制剂,临床上主要用于白细胞减少症的的防治与治疗。本课题的理论基础为中医药理论,设计方法为正交试验法,实验目的是确定芪白颗粒最佳制备工艺,对该制剂的质量标准进行研究;并初步探讨芪白颗粒升白作用。主要内容如下:一、芪白颗粒制备工艺研究将处方中12味中药分成两大类,其中天花粉、茯苓、三七为一类,粉碎后原粉入药,其余黄芪、白术、黄芩等9味药为一类,有效成分经提取入药。以正交试验法为设计方法,考察芪白颗粒处方中其余9味药的提取工艺。该部分研究中的提取溶剂为蒸馏水,考察因素为溶剂用量、提取次数和提取时间,考察指标为浸膏得率和黄芩苷含量。通过研究将最佳提取工艺拟定为:以上9味药材的提取,溶剂用量为8倍量的水,提取次数为2次,提取时间为第一次2小时(黄芩沸后加入),第二次1小时,滤过,合并滤液,备用。以正交试验法为设计方法,考察水提液的醇沉纯化工艺。该部分研究中的考察因素为药液含醇量和药液相对浓度,考察指标为浸膏得率和黄芩苷含量。通过研究将最佳醇沉工艺拟定为:采用减压浓缩方式进行浓缩,至滤液浓缩为相对密度为1.18-1.22(60℃C)的清膏,加一定量的乙醇,至药液中的乙醇含量为60%,搅匀,药液静置12h后,取上清液,备用。以对比试验为设计方法,考察颗粒的成型工艺。该部分研究中的考察因素为糖粉、糊精加入量,考察指标为颗粒的抗湿性和口感。通过研究将最佳成型工艺拟定为为:采用减压浓缩法,回收将上述清膏中的乙醇溶液,浓缩至稠膏,加入天花粉、茯苓、三七细粉,再按一定的比例(稠膏:糊精:蔗糖粉=1:1:1)添加辅料,混匀。以75%乙醇制粒,颗粒于60℃干燥。二、芪白颗粒质量标准研究以“颗粒剂”制剂通则为指导,检查芪白颗粒的粒度、水分、溶化性、装量差异及微生物限度。采用显微鉴别法对天花粉和茯苓2味药材进行定性鉴别:采用薄层色谱法对黄芪、三七以及甘草3味药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对黄芩药材进行定性鉴别试验。结果表明,以上鉴别方法简单、安全、有效,可以对芪白颗粒中的6味药进行定性鉴别。采用高效液相色谱法(HPLC)检测芪白颗粒中黄芩苷含量:色谱柱:Prevail C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸水溶液(50:50),流速:1.0mL·min-1;进样量:10μL;检测波长:280nnm;柱温:25℃C。结果表明,该方法科学、灵敏、快速、可靠,可以准确检测出制剂中黄芩苷的含量。三、HPLC法同时测定芪白颗粒中5种活性成分的含量采用多指标质量控制模式对芪白颗粒进行质量控制,借助高校液相色谱仪,建立一种同时测定芪白颗粒臣药黄芩、女贞子以及贵重药材三七中的黄芩苷、特女贞苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R15种指标成分含量的方法;色谱柱:Prevail C18(4.6 mm×250mm,5μm);流动相甲醇(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0mL·min-1;进样量:10μL;检测波长:203nm;柱温:25℃。结果表明,该方法简单、准确、快速,可以全面、准确评价芪白颗粒的质量、确保临床疗效。四、芪白颗粒主要药效学研究通过建立昆明小鼠白细胞减少症模型,灌胃给予模型小鼠不同剂量的芪白颗粒,研究芪白颗粒对小鼠白细胞减少症的预防和治疗作用。结果表明,芪白颗粒可以升高模型小鼠外周白细胞数目,增加骨髓有核细胞数,同时也能增加小鼠的脏器系数、体重,延长白细胞减少症模型小鼠的负重游泳时间。结果提示芪白颗粒有明显的升白作用。


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