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藏药狭叶红景天资源及质量分析研究

洪道鑫  
【摘要】:狭叶红景天(藏文名“嘎都尔曼巴”,(?)),为藏族习用药,含有没食子酸、红景天苷、酪醇等成分,具有抗缺氧、抗衰老等功效,主治瘟病,肺热,中毒及四肢肿胀等。藏医药经典著作《月王药诊》、《四部医典》、《晶珠本草》均有记载。《中国民族药辞典》记载狭叶红景天在哈萨克族、羌族、维吾尔族、藏族中使用。且收载于《四川省藏药材标准》(2014年版),含量测定指标性成分为红景天苷。近年来由于过度采挖,加之生长环境及自身条件的限制,导致红景天野生资源急剧缩减,狭叶红景天具有与大花红景天相似的药效作用,考虑狭叶红景天能否作为大花红景天的替代品种。因此,对其资源现状、用药安全性以及栽培技术研究十分必要。开展其资源调查、生态适宜性研究、化学成分积累与生态因子相关性研究、~1H-NMR代谢组学研究等,为藏药狭叶红景天野生资源保护和人工栽培种植提供参考。目的:11.调查狭叶红景天野生资源分布和生态适宜性特点,为狭叶红景天资源利用提供依据。2.对不同产地狭叶红景天有效成分测定,与生态因子做相关性分析,为狭叶红景天品种选育提供依据。3.通过~1H-NMR技术对不同产地和不同生长年限狭叶红景天中的代谢成分进行宏观评价和分析,为狭叶红景天人工栽培提供依据。方法:1.结合狭叶红景天标本与文献查阅,采用野外调查与参观蔵医院的方式进行狭叶红景天种质资源调查。2.从全球气候数据库中提取生态因子,基于Maxent模型设置ROC评价曲线,同时运用Arc GIS软件,对狭叶红景天进行适宜性区划研究。3.采用比色法和硫酸-蒽酮法对狭叶红景天中总黄酮和多糖进行定量测定;采用HPLC-UV-ELSD法对狭叶红景天中没食子酸、百脉根苷、红景天苷、酪醇进行含量测定。4.采用中国气象科学数据共享服务网平台获得不同产地的平均气压、年降水量、平均风速、日照时数、相对湿度、年平均温度、年最高温度、年最低温度等9个生态因子数据,通过PLS、RDA等方法分析了化学成分含量与生态因子之间的相关性。5.采用~1H-NMR分析技术建立指纹图谱,并利用相关系数法计算不同产地狭叶红景天药材指纹图谱的相似度。采用大田试验的方法,对不同生长年限的狭叶红景天进行生长指标测定;采用~1H-NMR技术对不同生长年限的狭叶红景天代谢成分进行分析。结果:1.通过野外调查发现,四川省地区的野生狭叶红景天种群密集程度有很大的差别,很多地区野生资源蕴藏量逐渐下降。根据调查结果估算,四川省地区当前狭叶红景天野生资源蕴藏量约1100 t。2.结合Maxent模型和Arc GIS分析,结果表明狭叶红景天分布在青藏高原地区、新疆部分地区以及陕西、山西、河北等部分区域,主要受海拔、最暖季度降水量、最冷季度降水量、土壤中泥沙比例等影响。在我国适宜区面积71.7万平方千米,较适宜区面积为188.2万平方千米。3.建立了狭叶红景天中没食子酸、红景天苷、酪醇、百脉根苷含量测定的方法。经PLS及RDA分析,狭叶红景天中红景天苷与海拔、日照时数呈强正相关关系。与相对湿度呈强负相关关系。4.鉴定了狭叶红景天提取物中23个初生和次生代谢产物,包括酚酸类、黄酮类、氨基酸类、糖类、脂肪酸类等成分。另外,13批药材指纹图谱的平均相似度为0.979。将~1H-NMR数据经过积分,通过Simca-P做PCA分析以及PLS-DA分析,能过明显区分不同年限的狭叶红景天。结论:1.基于Maxent模型和Arc GIS技术对狭叶红景天进行适宜性区划研究,对其进行适生性等级划分,为狭叶红景天野生抚育及人工规范化种植基地的选取提供科学依据。2.不同产地的气候存在明显的差异性且不同产地狭叶红景天药材在化学成分上有明显的差异性。应用PLS、RDA等方法分析了生态因子对含量的影响以及相关性。3.~1H-NMR分析方法具有整体性的特征,并且样品制备简单、分析快速、重复性好,建立的指纹图谱为狭叶红景天药材的质量控制与评价提供了科学依据。将相对含量法与主成分分析法相结合,能对不同生长期的狭叶红景天药材中的活性成分进行宏观评价和分析,可作为植物药材代谢组学的研究方法。


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