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基于文献整理和数据挖掘的藏医治疗HAPC用药规律及多血康胶囊临床研究

更藏加  
【摘要】:高原红细胞增多症(High Altitude Polycthemia,HAPC)是由于机体长期处于高原低氧环境下,造成供氧与耗氧的平衡失调,红细胞生成过多,血液黏滞性增高,血流阻力加大,摄氧和运氧功能减退,从而进一步引发急性肺水肿、急性脑水肿、肺动脉高压、高原心脏病等一系列并发症的一种慢性高原病。藏医《四部医典》称之为“(?)查培乃”,译称多血症。该病严重影响到高原人民的生命和生活质量。随着我国经济、旅游和国防事业的发展及旅游线路的开通,迁徙高原居住的人数显著增多,从而HAPC的发病率出现逐年上升。由于该病属于高发性、难治性疾病,探索针对HAPC防治的新策略、新方法是我国医学研究的紧迫课题。目的:1.挖掘整理藏医古籍和现代文献中潜在的多血症发病机制、治则治法、诊疗经验;分析HAPC研究趋势、领域、机构、人员的分布情况等热点问题。2.挖掘藏医治疗HAPC方剂中的高频次用药模式,核心药物组合,药对及新方等,以明确“病-方-药”之间的内在联系和用药规律;同时,探索藏药方剂中高频次藏药治疗HAPC多成分、多靶点、多通路的调节机制,通过靶点与通路的分析构建出“化合物-靶点-通路”的网络模式图。3.进一步验证藏药“(?)多血康胶囊”对HAPC的临床疗效,为藏医临床治疗同类复杂疾病及新药研发提供科学依据。方法:1.挖掘整理历代藏医典籍和现代文献中隐藏的多血症病因病机、治则治法、诊疗经验等相关信息;将CNKI和Web of Science数据库中检索相关文献数据,运用Note Express软件和Cite Space V软件对HAPC研究趋势、领域、机构、人员分布情况进行统计分析。2.收集藏医药古籍文献中治疗HAPC的方药信息,密切结合藏医临床现状,采用中医传承辅助系统(V2.5)软件,利用软件集成的熵方法,对比探讨藏医药治疗HAPC、HAPE组方用药之间的关联规则、高频次藏药用药模式、核心药物组合,分析HAPC和HAPE用药规律,以明确“病-方-药”之间的内在联系。3.选取治疗HAPC藏医方剂中高频次使用的四味藏药,通过网络药理学方法筛选出四味藏药的有效化学成分-作用靶点-通路信息-通路注释及GO富集分析,分别构建四味藏药的“化合物-靶点-通路”网络模式图。4.依据HAPC国际诊断标准,对入选的14例HAPC患者采用静脉灌注扫描法获取服用“藏药多血康胶囊”30天前后的核磁共振脑成像数据、血常规、体征、脉搏血氧饱和度等指标。5.通过“检测→给药→检测”的方法,比较服药前后各项指标差异,最终验证“藏药多血康胶囊”的临床疗效。结果:1.通过藏医药文献分析得出:藏医认为HAPC是由于外源引起机体消化、吸收和分解的“三胃火”代谢功能紊乱,导致精华不化,糟粕侵入致血管中坏血聚集的主要病机;藏医通过不同的证型采用不同的方剂和治疗方法。另外,古籍和现代文献中提出应随个体差异结合其胃火,采取不同的治疗方法,并且在藏医治疗多血症时采用的密宗咒语加持疗法,对饮食、药物和外治疗法均起到辅助作用。2.通过文献计量学与知识图谱的结合性研究发现国内对HAPC的研究形成了以西藏军区总医院,青海省人民医院,第三军医大学三大为主的三大主流机构,以及以李素芝,牟信兵,薛增军形成的研究血清红细胞生成素(EPO)对高原红细胞增多症的合作网络。国外研究的国家主要集中在高海拔多山的南美地区,如秘鲁,玻利维亚等,此外美国以其强大的科研实力和发文量跃居第一,对比中美两国的基金资助情况发现,中国对于HAPC研究的投入并不亚于美国,但是无论从发文数量和发文质量来看与美国之间还是存在较大的差距。3.收集的治疗多血症(HAPC)的方剂210首(包含的2236味藏药)、治疗HAPE的方剂369首(包含的3419味药物)中的药物频次进行统计,发现治疗HAPC方剂中,使用频数最多的药物是诃子(109),依次为:木香(87)、西红花(82)、余甘子(76)、肉豆蔻(69);将“支持度个数”设为34,置信度设为0.9时,使用频次前5位的用药模式依次为诃子-余甘子、木香-诃子、西红花-诃子、诃子-肉豆蔻、丁香-肉豆蔻;常用药物组合中关联药物分别为毛诃子→诃子、毛诃子→余甘子、毛诃子,余甘子→诃子、诃子,毛诃子→余甘子;在核心组合提取的基础上运用无监督熵层次聚类算法,发现支持度≥20%,置信度≥0.9的关联规则共演化得出新处方11首,且在适宜证候一栏中输入210首方剂的功效,得出的适应证候统计结果为血症(135)、隆型(127)、赤巴型(120)、培根型(67)、木布病(35)。其中使用频次在46次以上的药物共有24味;治疗HAPE方剂中,使用频数最多的前10味药物频次从高到低依次为:诃子(157)、西红花(136)、木香(136)、肉豆蔻(110)、天竺黄(106);将“支持度个数”设为59(≥16%,表示至少在34首方剂中出现),置信度设为0.9,得到共30条数据,并建立用药模式及相关联的网络展示图。其中使用频次前5位的用药模式依次为木香-诃子;西红花-天竺黄;诃子-余甘子;西红花-诃子;丁香-木香;对治疗HAPE的369首方剂的药物配伍关系进行挖掘,按置信度由高到低排列,关联分析结果。其中,常用药物组合中置信度靠前(90)的关联药物为葡萄→甘草;毛诃子→余甘子;草果→白豆蔻;毛诃子→诃子;乳香→诃子;在核心组合提取的基础上运用无监督熵层次聚类算法,得到21个新处方。4.在治疗HAPC高频次使用藏药中选择诃子、木香、西红花、肉豆蔻四味藏药,每味藏药各自选取典型化学成分做为研究对象,采用TCMSP、KEGG、MAS3.0、Drug Bank、Pharm Mapper等数据库和Cytoscape软件,应用网络药理学方法,分别探索了四味藏药治疗HAPC的靶点和机制。四味药分别筛选得到与HAPC相关的16、20、20、15个靶点,具显著意义(P0.01)的通路17、17、24、14条。通过对靶点和通路的分析,提示这四味药在治疗HAPC的过程中,主要都是通过介导机体细胞繁殖和氧化应激、发挥抗炎作用、参与调节血管等功能,达到降低血红蛋白、增强机体免疫力的效果从而发挥治疗HAPC的作用。这为进一步深入研究各味药的作用机制奠定了基础,为藏成药的研究提供方法。5.临床试验中获取使用藏药多血康胶囊30天服药前后受试者的血常规、核磁共振脑部成像数据和血氧饱和度等,结果显示:根据14例患者使用藏药多血康胶囊给药前后头痛、头晕、紫癜、气喘、心悸、手脚发热的体征指标,RBC、HGB、HCT的血常规指标,Sp O2和PR的指标等比统计结果分析,发现有效13例,无效1例,总有效率92.9%,且给药前后P0.01,其统计结果具有显著意义,说明藏药多血康胶囊对HAPC疗效确切;通过14例患者的左侧额叶、右侧额叶、左侧颞叶、右侧颞叶、左侧枕叶、右侧枕叶等六个部位的CBF、CBV、MTT、TTP的核磁共振脑成像各项数据统计结果来看,藏药多血康胶囊对HAPC的治疗确有疗效。结论:1.通过文献研究发现,藏医将高原红细胞增多症归属于“多血症”范畴,其病因为坏血增多所引起,证型分为血型、隆型、赤巴型、培根型。2.通过数据挖掘发现,藏药治疗HAPE和HAPC两种急、慢性高原病的用药频率、用药模式、核心药物组合既有相同点又有不同点。3.通过网络药理学研究发现,藏医治疗HAPC具有多成分、多靶点、多通路的系统调节特点。4.HAPC患者给药前后核磁共振脑成像、血常规、血氧饱和度、心率及体征指标的对比结果表明,该药治疗HAPC疗效确切。创新点:1.通过藏医古籍与现代期刊的查阅,挖掘整理HAPC藏医病名的归属范畴、病因病机、治则治法及诊疗经验。2.采用文献计量学与知识图谱的研究方法,分析HAPC国内外研究趋势、研究机构、研究人员分布情况等;采用数据挖掘与网络药理相结合的方法,分析藏医药治疗该病的用药规律及作用机制研究。3.通过静脉灌注增强扫描核磁共振脑成像技术手段,通过比较左侧额叶等6部位、CBF等4指标的差异性作为藏药多血康胶囊治疗HAPC的评价指标。


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