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黄连解毒汤含药脑脊液对Aβ_(1-42)致BV2细胞凋亡及炎症反应的机制研究

彭红梅  
【摘要】:目的:探讨黄连解毒汤含药脑脊液对寡聚体Aβ_(1-42)诱导的BV2细胞凋亡与炎症反应的影响及其作用机制。方法:利用寡聚体Aβ_(1-42)诱导BV2细胞,复制细胞损伤模型。将处于对数期的BV2细胞随机分为空白对照组,Aβ模型组,石杉碱甲含药脑脊液组、黄连解毒汤含药脑脊液低、中、高剂量组,分别加入10%空白脑脊液,10%空白脑脊液,10%石杉碱甲含药脑脊液,5%、10%、20%黄连解毒汤含药脑脊液;除空白组外,其余各组加入终浓度为10μM寡聚体Aβ_(1-42),复制小胶质细胞凋亡模型。采用流式细胞术检测各组BV2细胞凋亡情况;Elisa法检测BV2细胞上清液中IL-10、IL-6、IFN‐γ表达水平;Western blot法检测BV2细胞Arg-1与i NOS蛋白表达水平。结果:1.与空白对照组比较,Aβ模型组BV2细胞凋亡率明显增加(~*P0.05),细胞上清液中IL-10显著降低(~*P0.01),IL-6、IFN‐γ水平明显升高(~*P0.05)。2.黄连解毒汤含药脑脊液能够降低寡聚体Aβ_(1-42)诱导BV2细胞凋亡。3.黄连解毒汤含药脑脊液能够升高BV2细胞上清液中抗炎因子IL-10(~*P0.05),降低促炎因子IL-6、IFN‐γ水平(~*P0.05)。4.黄连解毒汤含药脑脊液能够上调BV2细胞中Arg-1蛋白表达水平,下调i NOS于Cleaved Caspase-3蛋白表达水平(~*P0.05)。结论:1.寡聚体Aβ_(1-42)能够诱导BV2细胞凋亡,抑制BV2细胞M2型激活,促进BV2细胞促炎M1型激活,释放IL-6、IFN‐γ等促炎因子。2.黄连解毒汤含药脑脊液能够改善寡聚体Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎性因子释放,其作用机制可能与黄连解毒汤含药脑脊液能够保护小胶质细胞,减少小胶质细胞凋亡,从而减少IFN‐γ合成,促进抗炎因子IL-10释放,促进BV2细胞M2型激活,减少促炎M1型激活,降低IL-6表达水平有关。


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