收藏本站
收藏 | 论文排版

基于Ang/Tie-2信号通路研究补肾活血方导法孕前给药调控大鼠种植窗期子宫组织血管生成的分子机制

严莉  
【摘要】:研究目的:补肾活血方导法(保留灌肠)治疗肾虚血瘀型不孕症及体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)失败患者的临床疗效确切。在前期工作基础上,本实验研究基于Ang/Tie-2信号通路,观察补肾活血方导法孕前给药治疗对肾虚血瘀-胚胎着床障碍病证结合模型大鼠种植窗期子宫组织血管生成的影响,以揭示补肾活血方导法改善子宫内膜容受性的助孕机制。研究方法:选取SPF级动情周期规律的雌性SD大鼠60只,随机分成5组,动情前期时入组。模型组和给药组上午9:00左右给予羟基脲450mg/(kg·d),灌胃10天,于第4天开始皮下注射肾上腺素0.3mg/(kg·d)7天造成肾虚血瘀模型;空白组则予等量生理盐水灌胃和皮下注射。造模的同时,每日下午2:00左右各给药予相应药物治疗,空白组、模型组予等量生理盐水灌胃或灌肠。造模第11天起,阴道涂片筛选出各组动情期大鼠,每晚18:00按雌雄2:1合笼,第二天早上7:00观察阴栓或行阴道涂片观察精子,发现阴栓或精虫者为妊娠第1天。除空白组外,各组于妊娠第4日皮下注射米非司酮5.5mg/kg 1次,造成肾虚血瘀-胚胎着床障碍病证结合模型;空白组予等量芝麻油溶剂皮下注射。于妊娠第5天称重后,注射1%戊巴比妥钠麻醉后固定,剖腹行腹主动脉采血,然后迅速剖取子宫,电子天平称重并分类保存。测定种植窗期大鼠全血粘度及血浆粘度、血浆D-二聚体(D-dimer,D2)、血清孕激素(progesterone,P)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、胎肝激酶-1(fetal liver kinase 1,FLK-1),子宫湿重、子宫脏器指数、子宫内膜组织形态和螺旋动脉数量,子宫组织促血管生成素1(angiopoietin 1,Ang-1)、促血管生成素2(Angiopoietin 2,Ang-2)、酪氨酸激酶-2(tyrosine kinase-2,Tie-2)蛋白表达水平以及Ang-1、Ang-2、Tie-2、孕激素受体(Progesterone receptor,PR)m RNA表达水平。采用方差分析的方法比较各指标的组间变化。研究结果:1. 复制出符合肾虚血瘀-胚胎着床障碍特征的病证结合大鼠模型与空白组比较,模型组大鼠出现精神萎靡,拱背,倦卧少动,反应迟钝,皮毛稀疏甚至脱毛,耳朵、舌头、爪甲、尾部呈暗紫色等中医肾虚血瘀表现。模型组大鼠种植窗期全血粘度和血浆粘度均增高(P0.05),D2水平明显增高(P0.01),血清P含量明显降低(P0.01),血清VEGF、FLK-1表达降低(P0.05);模型组大鼠子宫内膜发育较差,被覆上皮薄,上皮细胞数量少,内膜腺体小而直,腺腔隙缩窄,部分间质致密,部分间质疏松,紧凑不一,间质发育不同步,螺旋动脉数量显著降低(P0.01);模型组大鼠子宫组织Tie-2蛋白表达量显著降低(P0.01),模型组大鼠子宫组织Ang-1、Tie-2 m RNA表达水平均显著降低(p0.01),Ang-2 m RNA表达水平增高(p0.05),PR m RNA表达显著降低,体现胚胎着床障碍特征。从整体到组织到分子,这些生理和生化指标均符合肾虚血瘀-胚胎着床障碍特征。2. 补肾活血方导法孕前给药对模型大鼠血液流变学和子宫血管生成的影响与模型组比较,补肾活血方低剂量组与阿司匹林组全血粘度5.s~(-1)降低(P0.05),补肾活血方高剂量组全血粘度显著降低(P0.01),血浆粘度有降低趋势;补肾活血方低剂量组螺旋动脉数量显著升高(P0.01),高剂量组和阿司匹林组血清VEGF、FLK-1及螺旋动脉数量显著升高(P0.01);补肾活血方低剂量组子宫组织Tie-2蛋白及m RNA表达增高(P0.05),Ang-1 m RNA表达显著升高(P0.01),高剂量组和阿司匹林组Ang-1、Tie-2蛋白表达量及Ang-1、Tie-2 mRNA表达水平均显著升高(P0.01),且高剂量组血清VEGF、血清FLK-1、螺旋动脉数量、Ang-1、Tie-2蛋白表达量及m RNA表达水平与空白组无统计学差异(P0.05)。表明补肾活血方导法治疗能改善上述指标,改善模型大鼠组织血瘀状态,促进子宫组织血管生成。3. 补肾活血方导法治疗对模型大鼠子宫内膜容受性的影响与模型组比较,补肾活血方低剂量组、高剂量组和阿司匹林组大鼠子宫湿重及子宫脏器指数均高于模型组(P0.05),且补肾活血方高剂量组与空白组之间无统计学差异(P0.05)。补肾活血方低剂量组、高剂量组、阿司匹林组大鼠子宫内膜发育较好,子宫内膜被覆上皮有增长趋势,血管丰富,腺体数量多,分布均匀,腺上皮多呈单层高柱状上皮细胞,间质疏松水肿,且高剂量组更为明显,表明补肾活血方可改善模型大鼠子宫内膜组织形态。补肾活血方低剂量组、阿司匹林组子宫组织PR m RNA增高(P0.05);补肾活血方高剂量组血清P增高(P0.05),子宫组织PR m RNA明显增高(P0.01)。以上均表明补肾活血方导法治疗可改善模型大鼠子宫内膜容受性。结论:1.肾虚血瘀-胚胎着床障碍病证结合模型大鼠具有精神萎靡,拱背,倦卧少动,反应迟钝,皮毛稀疏甚至脱毛,耳朵、舌头、爪甲、尾部呈暗紫色等中医肾虚血瘀表现,同时具备子宫湿重及子宫脏器指数降低,子宫内膜发育较差,孕激素水平降低等子宫内膜容受性不良表现,表明大鼠肾虚血瘀-胚胎着床障碍病证结合模型造模成功。2.补肾活血方导法治疗改善子宫内膜血流状态,提高子宫组织VEGF、FLK-1、Ang-1、Tie-2表达水平,维持Ang-2正常表达水平,促进子宫组织血管新生,增加子宫组织血液灌注及能量供给,可能是其助孕机制之一。3. 补肾活血方导法治疗可增加子宫湿重及子宫脏器指数,增加子宫组织血液灌注,改善种植窗期子宫内膜组织形态,并提高P、PR表达,从而改善子宫内膜容受性,促进胚胎着床。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前18条
1 严莉;郭珮;周航;夏宛廷;黄金珠;曾鹏飞;曾倩;;基于Ang/Tie-2信号通路研究补肾活血方导法调控大鼠种植窗期子宫组织血管生成的助孕机制[J];世界科学技术-中医药现代化;2020年06期
2 刘鹏;朱子昭;常柏;李巧芬;;生肌象皮膏对糖尿病溃疡大鼠Ang/Tie-2通路的影响[J];天津中医药;2018年02期
3 刘轲;李建生;郜利霞;宋张杰;杨歆科;韩向辉;刘敬霞;刘政国;周友龙;;老龄大鼠脑缺血/再灌注微血管生成及Ang/Tie-2系统的表达变化[J];中国老年学杂志;2013年03期
4 邵凯;汪琳仙;;大鼠发情周期的子宫组织雌激素受体定位的初步研究[J];北京农业大学学报;1992年01期
5 杨雅楠;刘成泽;王彪;铁雅楠;王欣荣;;绵羊VEGF基因与Ang/Tie-2信号通路在卵巢中的表达分析[J];农业生物技术学报;2018年07期
6 陈秀荔;赵永贞;尹宝英;张彦明;;三维子宫组织的构建及形态学观察[J];畜牧兽医学报;2008年09期
7 张树成,吴志奎,沈明秀;补肾调经和补肾生血中药促进子宫组织血管生成的形态学观察[J];中国中医基础医学杂志;1998年08期
8 黄艳;孔令希;王宁;;替硝唑对盆腔炎模型大鼠血浆和子宫组织中左氧氟沙星药动学的影响[J];中国药房;2016年31期
9 马战军;王天堂;毛丰刚;;负压通过Ang/Tie-2信号通路促进糖尿病大鼠创面微血管成熟的实验研究[J];中国骨与关节损伤杂志;2018年09期
10 王剑;陈钢;;柴胡止血液对置节育器大鼠性周期不同时相子宫组织内皮素-1含量的影响[J];吉林中医药;2005年11期
11 陈盼碧;杨孝芳;王兴桂;杨志虹;冯麟;宣锦;;隔药灸脐法对原发性痛经大鼠神经-内分泌-免疫网络的调控与影响[J];时珍国医国药;2017年02期
12 曾蔚越,颜芳,王玉;米菲司酮对一氧化氮刺激小鼠子宫组织合成PGE_2的调节作用[J];华西医科大学学报;2000年04期
13 吕晓刚;王沂峰;陈高文;余萍;祝颖;;人类子宫组织耐受冷缺血损伤时限的探讨[J];器官移植;2014年01期
14 张茜薇;阮氏水;王娜;邢聪丽;宋卓敏;;益气消癥方对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠子宫组织血管生成的影响[J];中医杂志;2014年05期
15 孔祥峰;胡元亮;黄小燕;郭振环;何子双;;中药新促孕液对母畜子宫内膜炎的疗效和抗炎机理研究[J];广西农业生物科学;2007年01期
16 刘以训,贾晓池;妊娠大鼠在着床期间雌激素及其受体含量的变化[J];生理学报;1981年01期
17 暴国;张长勇;饶永;徐祥波;陈西华;郑玉峰;贺斌;;新型超细晶铜材料植入大鼠子宫中Cu~(2+)释放及对子宫组织的影响[J];中国计划生育学杂志;2020年01期
18 李佳;陈必良;张建芳;;p-JNK蛋白在妊娠期糖尿病孕鼠子宫组织中的表达及其意义[J];中国妇幼保健;2010年30期
中国重要会议论文全文数据库 前5条
1 廖端芳;庹勤慧;;Ang/Tie-2系统在糖尿病小鼠心肌缺血损伤中的作用[A];中国药理学会第十次全国学术会议专刊[C];2009年
2 董春娟;戴建建;纪敏;章静茹;朱彦慧;纪春岩;;Notch和Ang/Tie-2信号系统在急性髓系白血病患者血管新生中相关关系研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
3 万荷天一;罗小光;黄姗;马欢;万飞;;通络刮痧对气滞血瘀证大鼠抗氧化作用与子宫组织血管新生的实验研究[A];全国科研理论学术研究成果汇编(三)[C];2020年
4 张绍芬;蒋竟;夏贤;朱慧庭;刘旸;毕崇萍;刘建华;;托瑞米芬对更年期大鼠骨与子宫组织的选择性调节作用[A];中华医学会第三次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨骨质疏松诊断技术继续教育学习班论文汇编[C];2004年
5 张艳霞;郭菊芳;林川;陆露;李成志;;低强度超声对早孕大鼠药物流产后子宫组织中内皮素-1和一氧化氮的影响[A];中国超声医学工程学会第八届超声治疗专委会学术会议、第六届仪器工程开发专委会学术会议、第五届超声生物效应专委会学术会、重庆超声医学工程学会学术会议论文集[C];2013年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 张继红;Ang/Tie-2在结直肠癌中的表达及其分子机制的研究[D];吉林大学;2011年
2 庹勤慧;Angiopoietin-1对糖尿病小鼠心肌缺血损伤的保护作用及机制研究[D];中南大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 严莉;基于Ang/Tie-2信号通路研究补肾活血方导法孕前给药调控大鼠种植窗期子宫组织血管生成的分子机制[D];成都中医药大学;2020年
2 童明月;电针联合康复训练通过干预Ang/Tie-2信号通路相关因子表达对局灶性脑缺血大鼠血管新生的影响[D];安徽中医药大学;2020年
3 蒋金凌;rLZ-8通过Ang/Tie-2信号通路改善大鼠局灶性脑缺血作用的研究[D];吉林大学;2015年
4 黄凤艳;CS_2对孕鼠子宫组织AKT/AMPK/mTOR信号通路的影响及NCG的干预作用[D];山东大学;2019年
5 吕晓刚;人类子宫组织短期冷缺血保存的研究[D];广州医学院;2012年
6 代炳芹;二硫化碳暴露对孕鼠子宫组织整合素和白血病抑制因子mRNA表达及DNA甲基化的影响[D];山东大学;2012年
7 韩洁;心理应激对雌性大鼠动情周期的影响及机制研究[D];天津体育学院;2020年
8 吕亮亮;VEGF、Ang/Tie-2在G-CSF动员造血干细胞中的作用[D];广西医科大学;2010年
9 周丽;盆炎坤和汤对盆腔炎性疾病后遗症大鼠血清IL-2、IL-6及血液流变学影响的实验研究[D];浙江中医药大学;2014年
10 于军红;健脾益坤方对围绝经期综合征大鼠影响的实验研究[D];河北医科大学;2015年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978