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非溶栓指征急性脑梗死治疗时间窗及中药复方中风醒脑口服液干预的临床和细胞培养研究

何迎春  
【摘要】: 目的:探讨急性脑梗死(acut cerebral infarction,ACI)非溶栓治疗时间窗以及中药复方中风醒脑口服液(简称ZFXN)干预的临床及细胞培养研究。 方法: 1 临床研究:(1)应用回顾性对照分析的研究方法,将1999年1月—2003年12月成都中医药大学附属医院应用ZFXN治疗的462例ACI病人,与同期甘肃省张掖地区人民医院481例ACI病人的概况进行了描述,并与国内外研究现状进行对比分析;(2)对患者入院时的年龄、性别、梗死部位、伴发病积分、既往史积分、神经功能缺损评分(NIHSS)、生活能力评分(BI)、昏迷评分(GCS)与发病到就诊不同时间段(≤6h、6h—12h、12h—24h、24h—48h、48h—72h、72h—1w)进行分层基线齐性检验;(3)评价两组病人在不同时间段接受治疗后30d,60d,90d的病死率、神经功能缺损评分(NIHSS)、生活能力恢复良好评分(BI)、残疾评分(GOS)等疗效;(4)采用多元回归方法,研究分析影响病死率、生活能力恢复的相关因素及其最佳治疗时间窗。 2 实验研究:(1)运用血清药理学和脑脊液药理学方法,取正常Beagle犬含药脑脊液、血清及线拴法制备的大鼠急性脑缺血模型的含药血清;(2)采用原代皮层神经细胞培养方法对新生SD大鼠大脑皮层进行体外培养,并鉴定神经细胞的纯度;(3)建立离体的神经细胞谷氨酸缺血缺氧损伤模型,利用噻唑兰比色法(MTT),通过测定光密度值(OD)筛选正常Beagle犬含药脑脊液、脑缺血SD大鼠含药血清的最佳剂量;(4)通过形态学观察、噻唑兰比色法(MTT)及流式细胞技术,检测含药脑脊液、含药血清对谷氨酸缺血缺氧损伤后6h,24h,48h,72h,96h的细胞活力、LDH漏出及细胞凋亡率。 3 文献综述:查阅中医古籍并通过中国医学检索光盘及Medline检索近十年来有关中风病、缺血性卒中、中风病与时间窗、脑梗死与时间窗、脑损伤与谷氨酸等有关文献,并进行了较详细的综述。 结果: 1 临床研究:(1)基线分析结果:两组病人在各时间段均具有可比性(P>0.05);(2)病死率:0—1w时间窗内接受ZFXN治疗可以降低90dACI患者的病死率, 成都中医药大学博士学位论文 与对照组比较有显著性差异(P0.05);(3)生活能力(BI):0一lw时间窗内接 受ZFXN治疗可提高60d、90d生活能力,尤其是0一24h内疗效更加显著;(4) 神经功能缺损(Nmss):0一一lw内接受ZFXN治疗可改善90d神经功能缺损 (p0.05),。一12h疗效更加显著(p0.01):(5)多元回归结果:基线GCs、伴 发病及治疗时间窗是影响ACI患者90d生活能力(BI)的主要因素(户0.05)。 说明ZFXN早期干预治疗后,可以改善患者长期生活质量:基线伴发病和昏迷 程度越重,预后越差;基线GCS、治疗方法是影响ACI患者90d病死率的主 要因素(P0.05,P0.01)。说明基线的GCS评分越重,死亡率越高,预后也 越差。积极干预可以降低病死率;(6)发病到就诊时间窗与疗效:发病6h、12h、 24h就诊并应用ZFXN治疗的患者神经功能缺损评分(NIHSS)、生活能力评分 (BI)残疾评分(GOs)优于对照组,具有非常显著性差异(P0.01);0一lw 应用也有作用(p0.05)。 2实验研究:(1)谷氨酸损伤合缺血缺氧损伤模型与单纯谷氨酸损伤模型比较, 其细胞存活率具有显著性差异(P0.01),说明该模型创建成功;(2) 10%中剂 量含药脑脊液、10%低剂量含药血清为最佳剂量浓度,与其它各剂量组比较具有 显著性差异(P0.05、P0.01);(3)ZFXNBe铭le犬含药脑脊液能增强0一96h 谷氨酸损伤神经细胞活力、减少12一96h LDH释放、降低0一96h细胞凋亡率, 与对照组比较均有显著性差异(P0.01);(4)zFXNSD大鼠含药血清与阳性组 (尼莫地平)比较,在12h、24h、48h对细胞活力、LDH释放均有作用(P 0.05),而ZFXN在72h、96h的作用与阳性组比较有显著差异,具有统计学意 义(P0 .05)。 3文献综述:古今中医对中风病的治疗积累了丰富的经验,其治疗有分期分阶 段、辨证、辨病、单方、复方等不同,处方用药则更是百花齐放;急性缺血性 脑卒中的治疗时间窗研究较少,大多认为6h是最佳治疗时间窗;对脑损伤与 谷氨酸的认识较一致,其治疗方法有减少突触前膜Glu释放、阻滞突触后膜 Glu受体等。 结论:(l)早期应用ZFXN能够改善ACI患者神经功能缺损状态,提高存活患者 的生活能力,降低病死率;(2)基线GCS、伴发病积分越重,死亡率越高,预后 也越差;发病后lw内积极治疗可以降低病死率、改善长期预后:(3)Z FXNIO% 中剂量脑脊液、10%低剂量血清对抑制细胞凋亡效果最佳;10%脑缺血模型含 成都中医药大学博士学位论文 药血清对神经细胞没有毒性作用;(4)ZFXN含药脑脊液、血清可以延长抑制神 经细胞凋亡时间窗;(5)Z FXN可能的神经保护机理:增强细胞活力、减少LDH 释放、抑制细胞凋亡;(6)l庙床及实验研究结论的得出,为急性脑梗死非溶栓患 者提供了一种有效的治疗途径。


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