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鱼腥草化学成份及其指纹图谱的研究

孟江  
【摘要】:鱼腥草为三白草科蕺菜属植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的干燥地上部分及新鲜全草,为四川省的特色中药之一。性味辛、寒,具有清热解毒、消肿排脓、利尿通淋的功效。主要用于肺脓疡、痰热咳嗽、热痢热淋、痈疮肿毒的治疗。在非典时期也用于抗SARS的治疗,具有一定的疗效。鱼腥草也有很高的食用价值,是一种营养价值极高的野生蔬菜,已被国家卫生部正式确定为“既是药品,又是食品”的极具开发潜力的资源之一。 国内外关于鱼腥草研究很多,但主要集中在挥发油部位,《中国药典》(2005年版)也仅以甲基正壬酮为标准品用薄层色谱法来定性控制鱼腥草的质量,这未能完全客观的反应该药的内在质量,不能有效的控制该药的临床疗效;同时鱼腥草的化学研究也仅限于脂溶性成分的研究,所以我们首次结合药效学对鱼腥草进行系统的化学研究,在此基础上,建立鱼腥草GC-MS,HPLC-DAD-MS指纹图谱和HPLC-DAD-MS法同时测定鱼腥草9个活性成分的含量测定方法,并对鱼腥草的不同产地,药用部位,干鲜品及其同科植物进行分析比较。 鲜鱼腥草用90%甲醇提取3次,滤液合并、过滤、减压浓缩后,依次用乙醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取,分别得到乙醚部位、氯仿部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。将各部位低温减压浓缩,真空干燥。氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取部位分别通过Diaion HP-20大孔吸附树脂、Sephadex LH-20,ODS和硅胶柱反复柱层析行分离。从中分离得到24个化合物,通过UV、IR、~1HNMR、~(13)CNMR、~2D-NMR及EI-MS等分析方法鉴定了19个化学成份的结构。分别为HC-7(金丝桃苷),HC-8(槲皮苷),HC-12(3,4-二羟基苯甲酸),HC-14(芸香苷),HC-E-5(异槲皮苷),HC-39(槲皮素),HC-M(绿原酸),HC-47(胡椒内酰胺),HC-50(马兜玲内酰胺B),HC-52(金线吊乌龟二酮碱B)。其中HC-16(山奈酚-3-O-β-芸香糖苷),E-2-3(槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-7-O-β-D-葡萄糖苷),HC-31(槲皮素-3-O-α-D-鼠李糖-7-O-β-D-葡萄糖苷),HC-32(4-羟基-4[3’-(β-D-葡萄糖)亚丁基]-3,5,5-三甲基-2-环己稀-1-醇),HC-34(2-[3,4 二羟基]-苯乙基-β-D-葡萄糖苷),HC-W-2(对羟基苯乙醇-β-D-葡萄糖苷),HC-2(绿原酸甲酯),HC-9(4-β-D-葡萄糖-3-羟基苯甲酸),HC-38(硝酸钾)等9个化合物为首次从蕺菜属及鱼腥草中分离得到。 建立鱼腥草GC-MS、HPLC-DAD-MS指纹图谱,GC-MS指纹图谱对鱼腥草的挥发油成份进行分析研究,通过质谱库及人工解析,确定16个共有特征峰的化合物结构;HPLC-DAD-MS指纹图谱,对鱼腥草的非挥发性成份进行分析研究,通过与标准品对照UV和MS图谱,对其中的11个共有特征峰进行结构鉴定。用GC-MS,HPLC-DAD-MS指纹图谱及其共有特征峰对鱼腥草不同产地,不同药用部位及干鲜品进行比较,结果显示不同产地,不同药用部位及干鲜品它们的指纹图谱虽有一定的相似性,但其化学成份分布不同,相对含量也不同,所建立的方法稳定,重现性好,可以用来区分鱼腥草及其不同产地,不同药用部位及干鲜品。鱼腥草的GC-MS指纹图谱和HPLC-DAD-MS指纹图谱结合起来,可以全面的控制鱼腥草的内在质量。 用HPLC-DAD-MS法建立鱼腥草的9个活性成份的含量测定方法,并比较


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