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梓葛冻干粉针对CoCl_2损伤PC12细胞的保护作用

徐玲  
【摘要】:目的:研究梓葛冻干粉针对CoCl2损伤PC12细胞的保护作用及其作用机制。 方法:运用不同浓度的CoCl2溶液作用于PC12细胞,通过MTT法检测细胞存活率,比较不同浓度CoCl2对PC12细胞的损伤程度,确定引起损伤最佳作用浓度;将PC12细胞分为正常组、模型组、梓葛冻干粉针12.25,24.50,49.00,98.00μg·mL-1浓度组,预先给予4个浓度的梓葛冻干粉针作用1h后,采用CoCl2损伤PC12细胞形成模型,采用MTT法测定细胞存活率,比色法检测细胞内SOD活性和细胞培养液中NO的含量,免疫印迹法检测Caspase-3, Bax, Bcl-2,IκBα蛋白的表达,研究梓葛冻干粉针对CoC1:损伤PC12细胞的保护作用及其作用机制。 结果:CoCl2对PC12细胞的存活率具有明显的抑制作用,随着浓度的增加其损伤作用增强,优选500μmol·L-1 CoCl2处理PC12细胞24 h作为损伤条件。梓葛冻干粉针12.25,24.50,49.00,98.00μg·mL-1浓度对正常PC12细胞生存活性无显著影响:与CoCl2损伤PC12细胞模型相比,12.25,24.50,49.00,98.00μg·mL-1浓度梓葛冻干粉针干预的细胞存活率显著增强(P0.05,P0.01),其中,49.00μg·mL-1浓度组细胞存活率达最大值(74.56±3.79)%(P0.01)。 进一步研究梓葛冻于粉针对CoCl2诱导PC12细胞凋亡的作用机制,结果发现,与损伤模型组相比,梓葛冻干粉针24.50,49.00,98.00μg·mL-1浓度能够显著提高细胞内SOD活性(P 0.05, P 0.01),12.25,24.50,49.00,98.00μg·mL-1浓度组能显著降低PC12细胞中NO的含量(P0.05,P0.01);梓葛冻干粉针各浓度组均能显著降低Casepase-3蛋白表达,24.50,49.00,98.00μg·mL-1浓度组能显著降低细胞内Bax与Bcl-2的比率(P0.05),49.00,98.00μg·mL-1浓度组能有效增加IκBα蛋白的表达(P0.05),表明梓葛冻干粉针保护CoCl2损伤PC12细胞的作用机制可能是增加自由基清除,抑制自由基生成,并通过抑制线粒体介导的细胞凋亡途径来实现。 结论:梓葛冻干粉针对CoCl2损伤PC12细胞具有明显的保护作用,其作用机制与其提高细胞缺氧条件下的抗氧化能力及抑制细胞凋亡有关。


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