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两株对BmNPV侵染差异的家蚕细胞系的全基因组表达谱分析

王婷婷  
【摘要】:蚕丝业是我国重要而古老的经济产业,然而受蚕病的影响,我国蚕丝量每年的损失高达20%。家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclearpolyhedrosis virus, BmNPV)是蚕业上危害最严重且最常见的一类病原微生物,至今没有有效的药物控制方法,家蚕一旦发生病毒感染,就严重的影响蚕丝产量和质量,所以目前急需解决的问题是获得控制BmNPV病毒侵染的相关基因,为将来培育抗病毒的转基因家蚕品系提供靶标基因。本实验利用两株来源相同,但对BmNPV侵染存在差异的特殊家蚕卵巢细胞BmN细胞(对BmNPV不感染)和BmN-SWU1细胞(对BmNPV高度感染)为实验材料,利用目前应用最广泛的表达谱基因芯片技术和生物信息学方法,分析两种细胞系与卵巢组织的基因表达谱特征及两细胞感染BmNPV后的基因表达谱特征,争取获得控制BmNPV侵染的相关基因,为BmNPV病毒的转基因抗性育种提供靶标基因。本研究获得的主要研究结果如下: 1.BmN和BmN-SWU1两细胞与卵巢组织的表达差异基因分别为3695和2474个,这些差异基因主要涉及到的生物功能有生理过程、细胞过程和催化活性这三大类。 2.BmN细胞感染BmNPV后在三个时间点共有25个差异表达基因,涉及到14种生物功能;BmN-SWU1细胞感染BmNPV后在三个时间点共有301个差异表达基因,涉及到134种生物功能。 3.荧光定量PCR检测BmN和BmN-SWU1两细胞感染BmNPV后的差异表达基因,结果表明,BmNPV侵染BmN细胞后在48h时GTP结合蛋白基因表达极其显著。BmNPV侵染BmN-SWU1细胞后在48h时细胞色素b5、S-腺苷甲硫氨酸、泛素特殊蛋白水解酶三个基因表达极其显著。


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