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波棱瓜子药材质量标准研究

王佩龙  
【摘要】:波棱瓜(Herpetospermum pedunculosum (Sex.))为葫芦科波棱瓜属一年生攀援植物,以种子入药。波棱瓜子味苦,性寒,泻肝火、胆热,解毒,临床上主治肝胆疾病,如黄疸型传染性肝炎,胆囊炎等。波棱瓜子在藏成药中广泛使用,需求量大。《中华人民共和国药典》1977版中曾收载了波棱瓜。现行质量标准为卫生部药品标准藏药第一册(1995版),仅有性状鉴别和显微鉴别,无含量测定;且定性鉴别仅有生物碱的鉴别。为准确、全面地控制波棱瓜药材的内在质量,为波棱瓜药材的生产和质量控制标准规范奠定基础,有必要对其质量标准进行深入系统的质量标准研究。 本研究将从药材检查、药材鉴别及采用一测多评法测定波棱瓜药材中有效成份含量三个部分建立波棱瓜药材质量标准。本研究主要内容如下: 1、药材检查 对波棱瓜子药材进行了水分、总灰分、醇溶性浸出物、重金属含量检查,并根据测定结果,对上述指标的含量限度做出规定。波棱瓜中水分含量范围为4.66%-10.97%,故暂定水分不得过12%;总灰分含量范围为3.89%-7.31%,故暂定总灰分含量不得过8%;醇溶性浸出物含量范围为12.55%-17.21%,故暂定醇溶性浸出物的含量不得少于12%;五种重金属含量:铅含量范围为0.00-2.60mg/kg,镉的含量范围为0.00-0.23mg/kg,砷的含量范围为0.01-0.13mg/kg,汞的含量范围为0.00-0.14mg/kg,铜含量范围为2.81-9.11mg/kg。 2、药材鉴别 (1)采用薄层色谱法,以herpetolide A和herpetotriol为对照品,对波棱瓜药材进行鉴别,12批不同产地波棱瓜子药材在相同条件下与对照品相同位置具有相同颜色斑点,结果斑点清晰,分离度好,可作为波棱瓜药材的定性鉴别方法。 (2)波棱瓜子药材HPLC指纹图谱研究:以herpetolide A为对照品,对12批次样品进行高效液相指纹图谱研究,获得具有18个共有峰的指纹图谱,各批样品与对照指纹图谱的相似度均在0.9以上。色谱图响应值高、基线平稳、分离度好,符合中药指纹图谱的技术要求,建立的HPLC指纹图谱可用于对波棱瓜药材的真伪进行鉴别及药材质量优劣进行控制。 3、一测多评法测定波棱瓜子中有效成分含量 以herpetolide A为内参物,建立其与herpetotriol的相对校正因子,用于测定herpetotriol的含量;外标法与一测多评法测定herpetotriol含量,两者相对误差小于2%,表明两种方法测定结果无显著性差异,一测多评法可用于波棱瓜子药材的质量标准研究。 4、通过以上研究,拟定波棱瓜子质量标准如下: 波棱瓜系葫芦科波棱瓜属一年生攀援植物波棱瓜Herpetospermum pendunculosum(Sex.)的干燥成熟种子。 [薄层鉴别](1)精密称取波棱瓜子药材1.0g,加入40mL甲醇,超声处理30min,放冷,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液1mL,即得供试品溶液。取HerpetolideA对照品,加甲醇制成herpetolide A lmg/mL作为对照品溶液。照《中国药典》(2010版)附录Ⅵ B薄层色谱法试验,吸取样品溶液3μL和对照品溶液2μL,点于硅胶GF254板上,以氯仿-乙酸乙酯-甲酸(5:1:0.2)作为展开剂,展开,取出,晾干,在紫外仪365nm下检视。供试品色谱中,在与对照品相应的位置上,显示相同颜色的斑点。 (2)精密称波棱瓜子药材1.0g,加入40mL甲醇,超声处理30min,放冷,用甲醇补足减失重量,摇匀,滤过,取续滤液1mL,即得供试品溶液。取Herpetotriol对照品,加甲醇制成herpetolide A lmg/mL作为对照品溶液。照《中国药典》(2010版)附录Ⅵ B薄层色谱法试验,吸取样品溶液3μL和对照品溶液2μL,点于硅胶GF254板上,以氯仿-丙酮-甲酸(8:4.3:0.7)作为展开剂,展开,取出,晾干,在紫外仪254nm下检视供试品色谱中,在与对照品相应的位置上,显示相同颜色的斑点。 [检查]水分使用烘干法进行测定,不得高于12%总灰分参照2010版《中国药典》(附录Ⅸ K)灰分测定法测定,不得高于8%醇溶性浸出物参照2010版《中国药典》(附录Ⅹ A)醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定,不得低于12% [含量测定]参照2010版《中国药典》高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定对照品溶液的制备分别精密称herpetolide A、herpetotriol对照品适量,制成浓度分别为6.8μg/ml、5.76μg/ml。 供试品溶液的制备供试品溶液的制备取波棱瓜子药材约1.0g,精密称定,置三角烧瓶中,精密加入甲醇20mL,密塞,称重,超声40min,放冷,称重,用甲醇补足减失重,摇匀,滤过,取续滤液,取续滤液4℃保存作为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品和供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定,即得。本品含Herpetolide A不得低于0.7%,含Herpetotriol不得低于3.6%。 [性味与归经]寒,苦。归肝、胆经。 [功能与主治]泻肝火,胆热,解毒。用于治疗赤巴病,肝病,胆病以及消化不良。 [用法与用量]3-6g。 [贮藏]置阴凉干燥处,防蛀。


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