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兽用双黄连注射液及其HPLC指纹图谱的研究

武煊  
【摘要】:近年来,利用高效液相色谱(HPLC)法建立指纹图谱来评价中药材及其制剂的质量已成为我国中药研究的热点之一。双黄连注射液由金银花、黄芩、连翘三味药组成,本课题参照《中华人民共和国卫生部药品标准——中药成方制剂(第十一册)》记载的药物配方,研制了兽用双黄连注射液,用HPLC法建立了其指纹图谱,并对其质量进行了全面的控制。 本课题内容包括:金银花、黄芩、连翘药材的筛选,兽用双黄连注射液制剂工艺筛选,兽用双黄连注射液实验室检验,兽用双黄连注射液HPLC指纹图谱研究。 1、用HPLC方法,按照《中国药典》(2005版)的标准,分别以绿原酸、黄芩苷、连翘苷的含量为标准对金银花、黄芩、连翘药材进行筛选。结果表明:绿原酸以山东平邑产金银花中含量最高;黄芩苷以河北承德产黄芩中含量最高;连翘苷以河南灵宝产连翘中含量最高。 2、以山东平邑产金银花、河北承德产黄芩、河南灵宝产连翘为原料进行了兽用双黄连注射液的研制。在研制过程中采用了传统制剂工艺、絮凝沉淀法、大孔树脂吸附法三种制备工艺。 传统制剂工艺采用《中华人民共和国卫生部药品标准——中药成方制剂(第十一册)》中记载的制剂方法。 运用均匀设计法对絮凝沉淀工艺中的絮凝剂浓度、絮凝时间、PH值、絮凝温度进行了多因素多水平分析,优化出絮凝沉淀法最佳制备工艺。 用单因素多水平分析法对大孔树脂吸附工艺中的大孔树脂型号、上液量、洗脱梯度各因素进行了考察,筛选出大孔树脂吸附法最佳制备工艺。 用紫外分光光度法对通过上述三种工艺制备的兽用双黄连注射液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷含量进行了测定,结果表明:大孔树脂吸附工艺制备的兽用双黄连注射液中这三种物质浓度均高于其它两种工艺。 3、对上述三种工艺制备的兽用双黄连注射液从稳定性、体外抑菌、制剂安全度等方面进行了实验室检验。结果表明:大孔树脂吸附工艺从各方面均优于其它两种工艺。对以大孔树脂吸附法制备的兽用双黄连注射液用Bliss法进行小白鼠的LD_(50)试验。结果表明:LD_(50)=79500mg/Kg,临床使用安全。 4、用HPLC法对10批兽用双黄连注射液样品进行分析,对色谱峰进行统计,得到16


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