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长寿沙田柚丛枝菌根及其Ri T-DNA转型根优化培养体系研究

仝瑞建  
【摘要】:丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,简称AM真菌或AMF)作为一种新型的生物肥料,存在于几乎所有类型的土壤中,可以与绝大多数被子植物的根共生;大多数农作物、果树、蔬菜、观赏植物和花卉等都能形成丛枝菌根。 AM真菌在植物和土壤间起着桥梁的作用,是植物和土壤间物质运输的载体。这种从植物到土壤和从土壤到植物的物质运输的载体,对植物和土壤的发育与健康都十分重要。 由于丛枝菌根在可持续农业和生态重建中所具有的重要意义,近年来,世界各国对植物菌根及菌根真菌的研究方兴未艾。已被证实,AM真菌可增加植物对水分和矿质营养的吸收,促进植物生长,提高作物抗逆性和抗病性,改良土壤。提高苗木移栽成活率,提高产量和改善品质等。因此,AM真菌在生态系统重建、生态平衡的维护以及农林业生产中具有重要的意义和广泛的应用。柑桔根系缺少根毛,对丛枝菌根的依赖性强。近年来,柚类发展迅速,长寿沙田柚(Citrus grandis cv.Changshou Shatian You)为重庆地方发展的名柚。论文以丛枝菌根研究为切入点,围绕长寿沙田柚菌根研究这一中心,力图在长寿沙田柚良性生态果园建设方面作些探讨和研究。 由于长寿沙田柚的丛枝菌根研究、毛状根诱导等都应在无菌条件下进行,因此,获得优质的无菌苗是进行一系列研究的基础。通过无菌苗的培育,研究长寿沙田柚苗期的发育生物学特征及培育的关键技术。重点研究了见光时间对苗期生长的影响,即在播种的第5d、6d、7d、8d和9d见光,分别比较了地下部分和地上部分30d内的生长情况,综合分析表明:第6d见光的苗子生长最好;对上述5个处理,分别在播种的第12d、15d、18d、21d、24d和27d进行移栽,通过移栽后生长势的观察比较,播种第18d、21d和24d移栽效果最好,且无显著差异。 AM真菌与转型Ri T-DNA胡萝卜(Daucus carota L.)根器官双重培养体系是研究AM真菌菌丝功能的有效方法。这种方法中,作为宿主的转型Ri T-DNA胡萝卜根促进了某些AM真菌孢子生产。利用这种原理和方法,笔者试图从长寿沙田柚中筛选出适宜的外植体,以期获得足量的转型根用于筛选高亲和性或高效AM真菌菌种(菌株),并开展长寿沙田柚菌根的生理生态研究。 实验设计了长寿沙田柚无菌苗不同外植体在光、暗条件下进行发根农杆菌遗传转化的试验,建立了长寿沙田柚Ri T-DNA转型根优化培养体系,该体系为:用对数期的发根农杆菌


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