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荧光和共振光散射法测定某些抗病毒药和心血管药的新方法研究

孟维伟  
【摘要】: 共振光散射法是二十世纪90年代发展起来的新分析技术,因其高灵敏度和简易性等优点而引起了人们的广泛兴趣和关注,本文以抗病毒药和心血管药为研究对象,发展了用共振光散射法测定它们的新方法,本文结合吸收和荧光分光光度法研究了共振光光谱的特性,适宜的反应条件和影响因素,讨论了反应机理,并建立了相应的分析方法。主要研究体系如下: 1.钯(Ⅱ)-盐酸吗啉胍螯合物与曙红Y相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用研究 在pH 4.2~5.0的HAc-NaAc介质中,盐酸吗啉胍(ABOB)与Pd(Ⅱ)反应形成螯合阳离子[Pd·(ABOB)_2]~(2+),它能进一步与曙红Y(EY)、赤藓红(Ery)和二溴荧光素(DBF)阴离子HL~-形成离子缔合物,此时将引起共振瑞利散射(RRS)的急剧增强并产生新的RRS光谱。盐酸吗啉胍与Pd(Ⅱ)和三种染料反应后的产物具有相似的光谱特征,最大RRS波长位于315 nm附近。在一定条件下散射增强(△I)与ABOB浓度成正比,EY、Ery和DBF3个体系的线性范围分别是0.012~1.2μg·mL~(-1)、0.23~2.3μg·mL~(-1)和0.24~1.5μg·mL~(-1)。方法具有较高的灵敏度,对于ABOB的检出限依次为0.0036μg·mL~(-1)、0.070μg·mL~(-1)和0.025μg·mL~(-1),其中以EY体系灵敏度最高,其次是DBF和Ery。本文研究了适宜的反应条件和影响因素,表明方法具有良好的选择性,并以EY体系为例考察了共存物质的影响。据此建立以曙红Y作探针,用RRS技术快速、简便、高灵敏测定ABOB的新方法。文中还对离子缔合物的形成和反应机理进行了讨论。 2.钯(Ⅱ)-盐酸吗啉胍螯合物与卤代荧光素染料相互作用的超瑞利散射光谱及其分析应用研究 在pH 4.4~5.0的HAc-NaAc介质中,钯(Ⅱ)与盐酸吗啉胍(Abob)反应形成螯合阳离子,它能进一步与二溴荧光素(DBF)、曙红Y(EY)、赤藓红(Ery)阴离子反应形成离子缔合物,引起超瑞利散射(HRS)显著增强。3个三元体系具有相似的光谱特征,最大HRS波长位于390 nm附近.在一定条件下超瑞利散射增强(△I_(HRS))与Abob的浓度成正比,其线性范围是0.05~3.0μg·mL~(-1)(DBF)、0.67~3.5μg·mL~(-1)(EY)和0.32~1.9μg·mL~(-1)(Ery),检出限分别为0.0086μg·mL~(-1)(DBF)、0.043μg·mL~(-1)(EY)和0.069μg·mL~(-1)(Ery)。本文研究了HRS法的适宜反应条件和共存物质的影响,发展了高灵敏、简便快速测定Abob的新方法,可用于尿样中Abob的测定。 3.钯(Ⅱ)-盐酸吗啉胍螯合物与曙红Y相互作用的荧光光谱分析及其应用 在pH 4.2~5.0的HAc-NaAc介质中,盐酸吗啉胍与Pd(Ⅱ)反应形成的螯合阳离子,它能进一步与曙红Y(EY)、赤藓红(Ery)、二溴荧光素(DBF)阴离子形成离子缔合物,引起荧光(FL)显著猝灭。盐酸吗啉胍与Pd(Ⅱ)与三种染料反应后的产物有着类似的荧光光谱,曙红Y(EY)、赤藓红(Ery),二溴荧光素(DBF)三体系荧光的最大激发和发射波长分别为:λ_(ex)/λ_(em)=518 nm/542 nm、λ_(ex)/λ_(em)=276 nm/305nm、λ_(ex)/λ_(em)=506 nm/533 nm,测定盐酸吗啉胍的检出限分别为:0.02μg·mL~(-1)、0.21μg·mL~(-1)、0.071μg·mL~(-1),而线性范围分别为:0.5~2.01μg·mL~(-1)、1.5~2.3μg·mL~(-1)、2.5~5.0μg·mL~(-1)。本实验重点研究了荧光猝灭法的适宜反应条件和共存物质的影响。 4.Fe(Ⅲ)—阿昔洛韦—K_3[Fe(CN)_6]的反应体系 在稀盐酸介质中,阿昔洛韦能还原Fe~(3+)为Fe~(2+),Fe~(2+)与[Fe(CN)_6]~(3-)反应生成配合物Fe_3[Fe(CN)_6]_2,此时能引起RRS光谱的显著增强。散射强度(△I)在一定范围内与药物浓度呈线性关系,方法对阿昔洛韦的检出限为0.038μg·mL~(-1),线性范围0.05~4.0μg·mL~(-1)。本文研究了RRS法的适宜反应条件和共存物质的影响,发展了高灵敏、简便快速测定阿昔洛韦的新方法,可用于尿样中阿昔洛韦的测定。 5.盐酸普罗帕酮与赤藓红相互作用的共振瑞利散射光谱研究及分析应用 在pH 4.4~5.0的HAc-NaAc介质中,盐酸普罗帕酮(PPF)能与赤藓红(Ery),二溴荧光素(DBF)阴离子形成离子缔合物,导致共振瑞利散射(RRS)的急剧增强并产生了新的RRS光谱。两体系的反应产物有相似的RRS光谱特征,最大RRS波长均位于300 nm附近,赤藓红(Ery),二溴荧光素(DBF)二体系用RRS法测定盐酸普罗帕酮的检出限分别为:0.021μg·mL~(-1)、0.075μg·mL~(-1),而线性范围分别为:0.5~2.5μg·mL~(-1)、0.5~2.5μg·mL~(-1)。本实验重点研究了RRS法的适宜反应条件和共存物质的影响,发展了高灵敏、简便快速测定盐酸普罗帕酮的新方法。 6.盐酸普罗帕酮与赤藓红相互作用的荧光光谱研究及分析应用 在pH 4.4~5.0的HAc-NaAc介质中,盐酸普罗帕酮(PPF)能与赤藓红(Ery),二溴荧光素(DBF)阴离子形成离子缔合物,引起荧光猝灭。赤藓红(Ery),二溴荧光素(DBF)二体系用荧光猝灭法测定盐酸普罗帕酮的检出限分别为:0.045μg·mL~(-1)、0.087μg·mL~(-1),而线性范围分别为:0.5~3.5μg·mL~(-1)、0.5~3.0μg·mL~(-1)。本实验重点研究了荧光猝灭法的适宜反应条件和共存物质的影响。


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