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重庆地区烟草黑胫病菌交配型及生理小种的研究

孙常伟  
【摘要】: 烟草黑胫病(tobacco black shank)在我国分布范围很广,除黑龙江省尚未发现之外,其余各植烟省区,包括台湾在内均有发生。烟草黑胫病菌(Phytophthoranicotianae)可以危害烤烟、晾烟、晒烟、白肋烟、香料烟等所有的栽培烟草,破坏力极强。 1.菌株来源 本研究从重庆主产烟区采集典型烟草黑胫病样品,分离、纯化得到12株烟草黑胫病菌菌株,加上由西南大学植物生态病理研究所提供的50株烟草黑胫病菌菌株,共62株。菌株来源覆盖重庆市酉阳、黔江、彭水、武隆、涪陵、万州、巫溪、巫山8大主产烟区。 2.菌株鉴定 分离到的烟草黑胫病菌菌株主要培养性状为:菌落无色,菌丝无隔,孢子囊多近球形,乳突明显,具脱落性,且孢子囊柄短,不对称孢子囊不常见;对烟草具有致病性。并通过聚合酶链式反应(PCR)对各地代表菌株的核糖体DNA内转录间隔区(rDNA ITS)的特异性扩增,得到了长度为892bp的特异性片段,经BLAST比对后,与烟草黑胫病菌的亲缘关系达到99%,明确供试菌株为烟草疫霉。 3.交配型测定 采用培养皿配对培养的方法对重庆市烟草黑胫病菌的交配型的研究结果表明:来自重庆市主产烟区的62株烟草黑胫病菌菌株,36株属A_2交配型,占58.1%,其余26株属于A_0交配型,占41.9%,未检测到其它交配型。研究结果未检测到A_1交配型的存在,因此可以初步认定,重庆市不是烟草黑胫病菌的起源中心,A_1交配型在重庆市没有分布或群体比例很小。研究结果进一步表明重庆市烟草黑胫病菌(Phytophthora nicotianae vat.nicotianae)的交配型符合烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae=Phytophthora parasitica)菌株的交配型在我国的分布规律。 4.生理小种的鉴定 供试的62个烟草黑胫病菌菌株和0号标准菌株在TTZ液体和固体培养基中皆变为红色,尤其在固体培养基中,颜色更为明显,从而排除了3号小种的可能。通过游动孢子悬浮液灌根接种鉴别寄主,结果表明:供试的62个菌株中54株为1号小种,8株为0号小种,其中1号小种为重庆烟区的优势种群。


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