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枇杷花化学成分及生物活性的研究

李琪  
【摘要】: 枇杷花系蔷薇科植物枇杷Eiobotrya.japonica(Thumb.)Lindl.之花。枇杷叶是一种常用中药,关于其化学成分及生物活性研究较多,但对于枇杷花的研究甚少,有关成分的抑菌及抗肿瘤生物活性的研究尚未报道。因此本文对枇杷花的化学成分及生物活性进行了初步研究。 对枇杷花采用溶剂系统提取法,分为乙酸乙酯部分、95%乙醇部分、50%乙醇部分和水层四个部分,对这四个部分进行黄酮显色鉴别及含量测定,发现黄酮主要集中于50%乙醇部分,各部分的黄酮类别有所差异,但主要有黄酮类、黄酮醇类及二氢黄酮类化合物。 本实验对枇杷花的乙酸乙酯提取部分采用硅胶柱层析、反相柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析,结合薄层色谱、半制备色谱进行多次分离纯化与重结晶,从中分离得到了7个化合物,其中化合物7为两种单一化合物组成的混合物;利用核磁共振(NMR)、质谱(MS)等现代化分析测试手段测定其化学结构,经过波谱分析、理化常数及文献检索,鉴定了这些化合物的结构,分别为:β-谷甾醇(1)、齐墩果酸(2)、熊果酸(3)、3β,19α-二羟基-4-醛基-乌索-12-烯-28-酸(4)、β-胡萝卜苷(5)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(6)、2α-羟基乌索酸与2α-羟基齐墩果酸(7)。其中化合物1、4、5、6、7为首次从枇杷花中分离得到。 在生物活性方面,采用纸片扩散法和MTT法对枇杷花乙酸乙酯层分离得到的片段以及单一化合物进行了抑菌、抗肿瘤细胞的生物活性实验。实验表明,乙酸乙酯层分离的片段及化合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用很弱;除化合物6外,对白色念珠菌均具有不同程度的抑制作用,其中化合物2、4、5、7的抑菌效果优于阳性对照组。MTT实验中,片段E2-2-1及化合物2、3、7对白血病细胞K562有较好的抑制效果,且为浓度依赖性抑制作用,抑制癌细胞K562生长作用最强的化合物3,剂量为20μg/ml时,抑制率达91.96%。根据单一化合物对抗肿瘤K562活性的研究,初步确定该植物抗肿瘤K562的主要活性成分是三萜类化合物。


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