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重庆产沼水蛙(Hylarana guentheri)皮肤及其分泌物镇痛活性物质的分离纯化及性研究

张康  
【摘要】:疼痛是一种与组织损伤相关的不愉快的主观感觉和情感体验,是人类最常见的痛苦之一。目前临床上常用的镇痛药品副作用较大,所以寻找副作用小且镇痛作用强的药物成为必然。很多两栖类动物,如中华蟾蜍等常被用作传统中药。这些两栖类动物的皮肤和内脏具有很广泛的药理活性及较好的临床疗效。已报道的药理活性有广谱抗菌、抗肿瘤、镇痛等作用。 本研究以重庆地区沼水蛙皮肤及其分泌物为研究对象,从中分离纯化出三种活性物质,主要研究工作包括以下几方面:①用四种方法提取沼蛙的皮肤及其分泌物,主要包括:剥皮、乙醚麻醉、肾上腺素刺激及电击方法。②四种提取方法的粗提物进行抗炎及镇痛实验,电击提取方法无抗炎性,剥皮、乙醚麻醉、肾上腺刺激三种方法均显示抗炎性;四种提取方法均显示有镇痛活性,剥皮和乙醚刺激的方法镇痛活性较高,且皮下注射600mg/kg,对小鼠无致死性;而肾上腺素刺激和电击方法镇痛活性较低③利用高效液相色谱仪从剥皮及乙醚提取物中分离纯化出三种单一镇痛成分a、b、c。色谱图显示均为单一峰。测得a、b、c三种成分的蛋白含量分别为1ug/ml、26ug/ml和228ug/ml。④对分离纯化出来的成分进行了性质分析研究;注射样品前后小鼠的自主活动差距较大,且a、b两个样品均显示了竖尾和跳跃反应,c样品既无竖尾反应也无跳跃反应;


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