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山葵提取物对军用标准指示菌的抑制作用及其抑制机理研究

韦伟  
【摘要】:长期以来,人们一直是利用苯甲酸钠和山梨酸钾等化学防霉剂来对抗和减小霉菌的危害。研究表明,化学防霉剂有较大的毒性。目前,世界范围内都在进行天然防霉剂的寻找开发研究,但是至今还没有一种比较理想的天然制剂的报道。山葵一直以来人们主要聚焦于它的药用功效的开发,对其防霉的功效,除了日本一家公司曾有简单的介绍之外,其余几乎未见报道,国内对山葵防霉功效的研究基本还是空白。 本文以开发山葵的防霉功能为目的,用山葵对国际常用的军用标准指示菌作了生长的抑制效果及其抑制机理研究,方法与结果如下: 方法: 1.采用山葵提取物对军标指示菌作了抑制作用试验,包括用滤纸片法比较山葵与几种其它防霉剂的抑制效果以及外界温度、PH值对抑菌效果的影响;MIC法测定山葵最小抑制浓度(MIC)和最小杀死浓度(MBC)。 2.通过显微镜计数法测试山葵对军标指示菌孢子萌发率的影响。 3.以考马斯亮蓝G-250染色法和3,5-二硝基水杨酸比色法测培养基中蛋白质和还原糖的含量,分析山葵对军标指示菌在生长过程中吸收利用营养物质速率的影响。 4.以外渗电导法测定山葵对军标指示菌细胞原生质膜的伤害率,分析山葵药物浓度与原生质膜伤害率的关系。 5.以ATPase测试盒测几种ATP酶活力,分析山葵提取物对军标指示菌细胞离子运输和离子梯度维系能力的影响。 6.以Clark电极法测线粒体呼吸速率,分析山葵提取物对军标指示菌细胞线粒体呼吸速率的影响。 7.以SDHase测试盒测SDHase活力,进一步分析山葵提取物对军标指示菌细胞线粒体中三羧酸循环和呼吸链的影响 结果: 1.山葵对几种军标指示菌抑制效果明显较化学防霉剂山梨酸钾和苯甲酸钠为好,其中对A.flavus,A.niger,A.versicolor and P.funiculosum四株菌的MIC与MBC分别为0.15mg/mL与0.20mg/mL;对C.globusum的MIC与MBC分别为0.10mg/mL与0.15mg/mL。并且在18℃—60℃之间,PH9.0弱碱性条件下作用效果较好,具有一定的热稳定性。 2.显微镜观察显示山葵对军标指示菌孢子萌发具有极强的抑制作用,经山葵


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