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杜仲皮水提物对虹鳟肠道菌群及肠道健康的影响

李礼  
【摘要】:本论文以虹鳟为研究对象,以肠道为靶组织,探究饲料中添加不同浓度杜仲皮水提物对虹鳟肠道菌群结构与多样性、肠道组织学结构、Toll样受体家族基因表达量及Toll样受体信号通路相关基因表达量的影响,研究结果丰富了虹鳟免疫增强剂的基础资料。主要研究结果和结论如下:1.杜仲皮水提物对虹鳟肠道菌群结构及多样性的影响试验幼鱼平均体重为(145.56±4.12)g,随机分为5组,每组3个重复,每个重复30尾,分别在虹鳟基础饲料中添加浓度为0%(对照组)、0.5%、1%、2%和4%杜仲皮的水提物,养殖周期为10周。结果显示:(1)2%和4%组Simpson指数显著高于0.5%和1%组(P0.05),但与对照组无显著差异(P0.05);1%组Shannon指数显著高于2%和4%组(P0.05),但与对照组和0.5%组无显著差异(P0.05)。(2)在门水平上,优势菌群为软壁菌门(Tenericutes)、厚壁菌门(Firmicutes)、梭杆菌门(Fusobacteria)、变形杆菌门(Proteobacteria)。(3)与对照组相比,有害菌群物种丰度在2%组肠道中下降最为明显,4%组除布鲁氏菌科Brucellaceae、鞘脂单胞菌科Sphingomonadaceae、苍白杆菌属Ochrobactrum物种丰度显著升高外,其余均显著降低(P0.05)。(4)与对照组相比,4%组肠道有益菌群慢生根瘤菌科Bradyrhizobiaceae、丛毛单胞菌科Comamonadaceae物种丰度显著升高(P0.05)。结论:虹鳟饲料中添加4%杜仲皮水提物能有效改善其肠道菌群结构。2.杜仲皮水提物对虹鳟肠道组织学的影响结果显示:饲料中添加杜仲皮水提物对虹鳟肠道皱襞结构、固有膜及肌层结构无明显地影响;其中4%组与对照组肠绒毛排列整齐,但0.5%组、1%组和2%组肠绒毛排列整齐度稍差;4%组与对照组杯状细胞数量未见明显变化,但0.5%组、1%组和2%组杯状细胞数量明显增多。结论:饲料中添加杜仲皮水提物对虹鳟肠道皱襞结构、固有膜及肌层结构无明显地影响,但0.5%、1%和2%组杯状细胞数量增多、肠绒毛排列整齐度稍差。3.杜仲皮水提物对虹鳟肠道Toll样受体家族基因表达量的影响结果显示:(1)1%和4%组肠道TLR1基因mRNA表达量无显著差异(P0.05),但均显著高于对照组(P0.05)。(2)4%组肠道TLR3基因mRNA表达量显著高于对照组和1%组(P0.05)。(3)对照组TLR5基因mRNA表达量显著高于1%和4%组(P0.05)。(4)TLR2、TLR4、TLR5m、TLR7、TLR9、TLR19和TLR22基因m RNA表达量组间均无显著差异(P0.05)。结论:饲料中添加4%的杜仲皮水提物可以明显上调虹鳟肠道TLR1和TLR3基因mRNA的表达量、明显下调TLR5基因m RNA的表达量。4.杜仲皮水提物对虹鳟肠道Toll样受体信号通路相关基因表达量的影响结果显示:(1)1%和4%组肠道IL-6、IL-12和MyD88基因mRNA表达量无显著差异(P0.05),但均显著高于对照组(P0.05)。(2)CD40、TNFα、NF-κBie、NF-κBid、IRAK4、IL-8及IL-1β基因mRNA表达量组间均无显著差异(P0.05)。结论:饲料中添加1%和4%的杜仲皮水提物均可以显著上调虹鳟肠道Toll样受体信号通路中IL-6、IL-12和MyD88基因mRNA的表达量,并通过Toll样受体信号通路起到免疫调控作用。综上所述,虹鳟饲料添加4%杜仲皮水提物能有效改善肠道菌群结构,并通过调控TLRs/MyD88/NF-κB信号通路而调节虹鳟肠道健康。


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