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绞股蓝总皂苷的提取分离及其前体脂质体制备研究

邓美林  
【摘要】: 绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino)是一种营养丰富药、食两用植物。现代药理学证明,绞股蓝皂苷具有抑制肿瘤、防止衰老、降低血脂、增强免疫力、镇静止痛、保护心脏和肝脏等作用。本论文研究了绞股蓝中活性成分绞股蓝皂苷的提取和纯化工艺,以纯化的绞股蓝皂苷来制备绞股蓝总皂苷前体脂质体,同时建立绞股蓝总皂苷前体脂质体的质量标准,考察其稳定性,为绞股蓝综合开发利用提供参考数据。 基于对绞股蓝不同部位总皂苷含量的定量分析,选择绞股蓝叶作为原料提取总皂苷。并以人参皂苷Rb_1为指标,对超微粉法和纤维素酶法提取绞股蓝总皂苷工艺进行对比研究,超微粉法提取工艺最佳条件为:粉碎度D_(50)为3.03μm绞股蓝总皂苷在醇体积分数为70%,料液比(g:mL)为1:30,提取温度为60℃的条件下提取60min,绞股蓝总皂苷提取率为4.25%。故本课题选用超微粉法提取绞股蓝总皂苷,该工艺提取用水量少,提取时间短,温度低,在工业生产中可降低能耗,提高经济效益。 经超微粉法提取的提取液经过壳聚糖澄清-大孔树脂纯化后得到淡黄色粉末,应用薄层色谱法和紫外法与标准品对照鉴定为总皂苷,其纯度为84.9%,为绞股蓝总皂苷脂质体的研制提供了原料来源。 根据绞股蓝皂苷的水溶性性质,选择逆相蒸发-冻融法来制备总皂苷脂质体。通过对总皂苷脂质体的处方和工艺的筛选和优化,制得的总皂苷脂质体最佳处方工艺为:皂苷浓度10mg.mL~(-1),脱氧胆酸钠:卵磷脂为1:5、胆固醇:卵磷脂1:3、甘露醇用量为2.5mL。得到的粒径D_(50)(71.5±20.5)nm(n=3),zeta电位为(-43.3±2.56)mv,包封率为56%,经过体外释放实验证明绞股蓝皂苷前体脂质体基本达到制剂研究设计要求。


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