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乳化异氟醚对成年大鼠学习记忆功能的影响

彭晶  
【摘要】:目的:通过Morris水迷宫实验,观察成年大鼠单次乳化异氟醚(EI)静脉麻醉前后行为学的变化,并检测大鼠血浆皮质酮、大脑海马BNDF, NGF的含量。为探讨EI对学习记忆功能的影响以及术后认知功能障碍的发生机理提供帮助,进一步为EI安全的应用于临床提供实验依据。 方法:成年雄性SD大鼠(N=72),随机分为空白对照组(C组n=12)、30%脂肪乳组(E组n=12)、8%乳化异氟醚组(EI组,内含四个亚组,即EI麻醉后2h、1d、7d、14d组,每组n=12)。麻醉前所有大鼠进行Morris水迷宫定位航行实验5d,让大鼠产生一定的学习记忆,同时记录大鼠从入水到爬上平台的时间和路程(即逃避潜伏期和总路程)作为大鼠定位航行实验的评价指标。第6d行空间搜索实验,观察大鼠记忆的巩固情况,记录大鼠120s内在平台象限停留的时间,平台象限游泳路程占总游泳路程百分比,以及120s内大鼠游泳的平均速度和经过平台次数,作为大鼠对水迷宫空间搜索能力测试的评价标准。测试结束后,C组不进行药物干预、E组给予30%脂肪乳(1.5ml/kg)尾静脉注射后2h与C组一起再次行水迷宫实验;EI组给予8%乳化异氟醚(1.5ml/kg)尾静脉注射后按上述分组,分别于麻醉苏醒后2h、1d、7d、14d再次行水迷宫实验,观察指标同麻醉前。水迷宫实验完成后将大鼠以1%戊巴比妥钠(4mg/100g)腹腔注射麻醉,取眼眶血2-4ml置于肝素管内,6℃下3000r/min离心15min后取血浆,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆皮质酮含量。每组随机抽取6只大鼠断头分别取其两侧海马,匀浆,匀浆液0-4℃下9000r/min离心15min取上清液,ELISA检测海马BDNF、NGF含量;各组另6只大鼠在各时点开胸,以4%多聚甲醛经主动脉行脑灌注后断头,取脑组织。石蜡包埋,切片,行免疫组化染色测定海马BDNF和NGF的表达。 结果:1、水迷宫实验结果显示:EI后2h组逃避潜伏期(15.5±5.3)s和总路程(386.8±127.2)cm明显长于C、E组潜伏期(8.8±6.1,9.3±2.8)s和总路程(234.8±118.4,291.6±89.3)cm(P0.01),EI后1d、7d、14d组潜伏期与总路程与C、E组相比无统计学差异(P0.05)。EI后2h组平台象限停留时间(35.0±9.8)s与C组平台象限停留时间(45.4±12.7)s相比明显缩短(P0.01);平台象限游泳路程占总游泳路程百分比、游泳速度和经过平台次数各组组间比较无统计学差异(P0.05)。2、ELISA检测结果显示:各组组间皮质酮含量比较无统计学差异(P0.05);EI后2h,1d组BDNF含量与C组相比有所减少(P0.05);EI后7d,14d组BDNF含量较EI后2h,1d组有所增加,但无统计学差异(P0.05); NGF含量从EI注射后1d开始升高,EI后1d,7d,14d组NGF含量与C,E组,EI后2h组相比均有明显增高(P0.01)。3、免疫组化染色结果显示:EI后2h组大鼠海马中DG区、CA3区BDNF阳性反应平均光密度值较C、E组减少,染色减弱(P0.05),其余海马分区BDNF含量各组组间比较无统计学差异(P0.05),大鼠海马NGF含量各组组间比较无统计学差异(P0.05)。 结论:单次尾静脉注射EI在2h内对大鼠学习记忆能力有一定影响,这可能与EI抑制大鼠海马BDNF的表达有关;EI注射后1d大鼠空间学习记忆能力即可恢复到麻醉前水平,因此,可以提示单次注射EI不会造成持久性的学习记忆功能损害。


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