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银丹心脑通预处理对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响

徐忠祥  
【摘要】:目的:通过观察银丹心脑通(Yindanxinnaotong, YDXNT)预处理对脑缺血再灌注大鼠模型神经细胞凋亡、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma, Bcl-2)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific protease, Caspase-3)的表达的影响,探讨YDXNT治疗缺血性脑血管病的作用机制。 方法:将32只SD雄性大鼠随机分为4组,分别为假手术组、模型组、尼莫地平组、YDXNT预处理组,尼莫地平组及YDXNT预处理组预先连续灌胃给药7天,每日1次,而假手术组和模型组每日灌服相当量的蒸馏水,第8天参照Longa等的线栓改良法制备大鼠大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,在缺血再灌注24小时后将大鼠断头取脑。然后分别计算各组脑片中梗死部分的重量百分比,以此评价各组脑梗塞的体积,使用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling, TUNEL)法检测各组缺血再灌24小时后神经细胞凋亡的阳性细胞数,使用免疫组化染色方法测定各组脑组织中Caspase-3、Bcl-2的表达并测定其阳性细胞数,通过分析其差异性,探讨YDXNT预处理对局灶性脑缺血再灌注脑损伤大鼠神经细胞凋亡的保护作用及其分子作用机制。 结果: 1脑缺血再灌注大鼠神经症状学评分YDXNT预处理组为2.125±0.354,尼莫地平组为2.25±0.463,模型组为2.375±0.744,假手术组为0,与假手术组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组及模型组均能引起明显的神经功能缺损(P0.05);YDXNT预处理组、尼莫地平组及模型组在神经症状学评分上无明显差异(P0.05)。 2脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积(梗死重量百分比表示):YDXNT预处理组为 3.625±2.374,尼莫地平组为3.237±1.937,模型组为11.954±6.024,假手术组无梗死灶,与假手术组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组及模型组均造成明显梗塞(P0.05);与模型组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组能明显减小梗死灶体积(P0.05):YDXNT预处理组与尼莫地平组在脑梗死体积上无差异(P0.05)。 3脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的阳性细胞数:YDXNT预处理组为22.25±7.283,尼莫地平组为19.1±5.3,模型组为49.3±12.192,假手术组3.65±2.346,与假手术组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组及模型组均引起较多的凋亡细胞数(P0.01);与模型组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组能明显减小凋亡细胞数梗死灶体积(P0.01);YDXNT预处理组与尼莫地平组在神经细胞凋亡的阳性细胞数上无差异(P0.05)。 4脑缺血再灌注大鼠Caspase-3阳性细胞数:YDXNT预处理组为31.65±4.987,尼莫地平组为28.35±7.734,模型组为51.3±9.7,假手术组6.35±4.171,与假手术组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组及模型组均引起较多Caspase-3阳性细胞数(P0.01);与模型组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组能明显减小Caspase-3阳性细胞数(P0.01);YDXNT预处理组与尼莫地平组在Caspase3阳性细胞数上无差异(P0.05)。 5脑缺血再灌注大鼠Bcl-2阳性细胞数:YDXNT预处理组为44.25±10.799,尼莫地平组为28.5±8.799,模型组为12.15±3.675,假手术组3.9±2.808,与假手术组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组及模型组均引起较多Bcl-2阳性细胞数(P0.01);与模型组比较,YDXNT预处理组、尼莫地平组能明显减小Bcl-2阳性细胞数(P0.01);与尼莫地平组比较YDXNT预处理组能增高脑组织中Blc-2的表达(P0.01)。 结论:银丹心脑通对缺血再灌注损伤有一定保护作用,能够减少缺血再灌注大鼠的脑神经细胞的凋亡,其作用机制可能与上调脑组织中Bcl-2的表达、减少脑组织中Caspase-3的表达有关。


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