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VEGF促进模拟不吻合静脉兔断肢再植成活的研究

赵兴东  
【摘要】: 目的:探讨VEGF对模拟不吻合静脉兔断肢再植模型微血管生成及静脉血液回流的影响,为临床治疗研究提供依据。方法:成年新西兰大白兔30只,雌雄不拘,沿双后肢踝关节平面离断,仅保留胫后动脉与足背动脉,离断组织除静脉外重新缝合,制作模拟不吻合静脉兔断肢再植模型,随机分为VEGF实验组和生理盐水对照组,每组15只,分别标记左后肢为组织活检侧,右后肢为观察肢体成活侧;实验组和生理盐水对照组再按术后放血时间又各随机分为3组,每组5只,放血时间分为6、9、12天共三个观察时间点。模型制作完成后立即于实验组离断平面环行注入含3μg VEGF的0.9%Nacl溶液0.5ml,对照组同法同量注入0.9%Nacl溶液。分别于术后6天、9天、12天切取左后肢离断面组织切片行HE染色观察微血管形态及组织愈合变化情况,CD34免疫组织化学染色测算微血管数量及管径,评价各组中微血管数量、管径的差异;右后肢亦同时停止放血,继续喂养实验动物5天,进行肢体存活大体形态学观察并照相,采用数码相机照相结合Image J医学图像分析软件计算皮肤成活率。结果:(1)大体标本观察:实验组及对照组术后6天停止放血后再植肢体有不同程度坏死,对照组比实验组范围大,皮肤成活率低于实验组,P<0.01,差异有显著性;术后9天、12天均无肢体坏死,对照组肢体肿胀比实验组明显、伤口愈合明显延迟。(2)HE染色显示:术后6天实验组以中、小血管生成为主,对照组以小血管为主,术后9天实验组以大血管生成为主,对照组以中血管为主,术后12天实验组血管开始吻合,管壁开始增厚,可看到瘢痕组织,对照组血管有吻合趋势,提示实验组伤口愈合的时间比对照组明显提前。(3)免疫组织化学染色显示:在不同观察时间点实验组血管密度均明显高于对照组(P<0.05),血管直径明显大于对照组(P<0.05),差异有显著性,均有统计学意义。组内比较均以术后9天血管密度最高(P<0.05)、血管管径最大,差异有显著性(P<0.05),有统计学意义。结论:(1)VEGF有促进微血管生成、改善模拟不吻合静脉兔断肢再植静脉血液回流、促进再植肢体成活的作用。(2)在血管生成过程中,术后9天左右血管密度最高、血管管径最大。


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