脑复苏后大鼠海马中Bcl-2/Bax的表达与灯盏花素干预
【摘要】：
目的:探讨灯盏花素(Breviscapine,Br)对Sprague-Dawley(SD)大鼠全脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤后大脑海马回中Bcl-2/Bax表达的影响,进一步阐明其在脑复苏中的作用机制。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术(SO)组24只;全脑缺血/再灌注(I/R)组24只;灯盏花素(Br)组24只;每组按其再灌注的时间又分为3、12、24、48小时(h)共4个观察时间点,采用简化的Pulsinelli等的四血管阻塞法建立大鼠脑I/R损伤的模型。假手术组与脑I/R组每6h腹腔注射0.9%的生理盐水1ml/kg,Br组则每6h腹腔注射Br2.5mg/kg,然后在每个时间点断头取脑。用免疫组织化学SABC法检测海马CA1区锥体细胞中Bcl-2/Bax的表达,测量其平均灰度值,用苏木精-伊红(HE)染色检测存活锥体细胞数,用TUNEL原位末端标记法检测凋亡锥体细胞数。结果:在I/R组,可见Bcl-2平均灰度值在3小时降低;Bax在3小时平均灰度值开始降低,12小时继续降低,24小时降低达到高峰,到48小时开始回升;存活神经元数目随再灌注时间的延长而减少(P均＜0.01);凋亡细胞数则随再灌注时间的延长而显著提高(P均＜0.01);在Br组,Bcl-2平均灰度值3小时开始降低,到12小时明显降低,在24小时和48小时开始回升;Bax在平均灰度值3小时降低(P均＜0.01);灯盏花素干预后Bcl-2的平均灰度值各时间点低于缺血再灌注组(P均＜0.01),而Bax的平均灰度值各时间点高于缺血再灌注组(P均＜0.01)。结论:大鼠全脑I/R后,灯盏花素可通过促进Bcl-2和抑制Bax的表达,从而抗细胞凋亡,增加存活神经元的数目而起到脑保护作用;12小时是灯盏花素作用决定海马CA1区神经元是否存活时间。
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