胰蛋白酶原激活肽与高迁徙率族蛋白1在急性胰腺炎大鼠模型中的表达及意义

【摘要】： 目的：研究胰蛋白酶原激活肽(trypsinogen activation peptide, TAP)与高迁徙率族蛋白1 (high mobility group box 1, HMGB1)在急性胰腺炎大鼠全身炎症反应中的作用及其机制。方法：将184只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,n=8)、模型组(B组,n=96)、丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate, EP)治疗组(C组,n=80)。B, C两组均分别采用2%与5%牛磺胆酸钠(2ml/kg)逆行注入胰胆管(注射时间2min)复制大鼠MAP与SAP模型,C组大鼠在制模后2h经鼠尾静脉注射丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate, EP)溶液(28mmol/L,40mg/Kg),每6h一次,B组于同一时点注射等量的乳酸林格氏平衡液。A组大鼠采集血液和胰腺,备测TAP浓度和HMGB1的表达；B组分1h、3h、6h、12h、24h、48h六个时间点,C组分3h、6h、12h、24h、48h五个时间点取材,酶联免疫吸附(ELISA)检测B组大鼠血清和胰腺组织TAP浓度；RT-PCR测定B、C两组胰腺组织、单个核细胞HMGB1 mRNA表达,Western Blot分析HMGB1蛋白表达；光镜下观察胰腺病理形态变化,进行评分；并作TAP、HMGB1、胰腺病理组织学评分的两两相关性分析。结果：TAP浓度于AP制模后1h开始升高,3h-6h达峰值,24h基本降至正常；HMGB1于12h表达上调,24h达峰值,48h仍维持高表达量；B组血清、胰腺组织TAP浓度较A组升高(P0.01), HMGB1 mRNA与蛋白表达均上调(P0.05); SAP模型的TAP浓度、HMGB1表达及胰腺病理组织学评分较MAP模型升高明显(P0.05)；与B组比较,C组HMGB1 mRNA和蛋白表达下调(P0.05),胰腺病理组织学评分降低(P0.05)。胰腺组织TAP浓度、HMGB1 mRNA与胰腺病理组织学评分的相关系数分别为r=0.863, r=0.847(P0.01), SAP、MAP两种模型胰腺组织TAP与HMGB1的相关系数分别为r=0.518, r=0.557 (P0.01).结论：复制AP模型后,TAP早期升高,中期开始下降,HMGB1表达量中期上调,晚期仍处于高水平；TAP、HMGB1均与AP严重程度高度正相关,并且TAP与HMGB1呈显著性相关,因此TAP与HMGB1在急性胰腺炎发病机制中发挥重要作用,加重胰腺损伤,EP可通过抑制血、胰腺组织HMGB1表达,减轻了大鼠胰腺损伤,对AP具有治疗作用。