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金钗石斛有效成分对脂多糖激活星形胶质细胞产生炎症因子的影响

张俊青  
【摘要】: 目的:观察金钗石斛生物总碱、石斛碱、石斛多糖对外源性内毒素脂多糖(lipopolysaecharide, LPS)激活大鼠大脑皮层星形胶质细胞(astrocyte, Ac)及诱导其产生和释放炎性介质的影响,重点探讨石斛生物总碱对星形胶质细胞的保护作用及机制。方法:分离、制备新生大鼠大脑皮层星形胶质细胞,传代至第三代时用LPS刺激细胞,观察不同浓度的石斛生物总碱(0.025、0.25、2.5mg/L)、石斛碱(0.025、2.5mg/L)、石斛多糖(0.025、0.25、2.5mg/L)对细胞激活的影响。通过MTS检测细胞存活率,试剂盒检测NO释放量,ELISA法检测NF-α、IL-6炎性因子蛋白的表达,实时定量多聚酶链反应(RT-PCR)检测炎症相关基因TNF-α、IL-6 mRNA的表达。结果:1.LPS刺激星形胶质细胞后MTS检测吸光度明显升高,NO含量、TNF-a和IL-6 mRNA及其蛋白表达均明显升高,与正常组比较有显著性差异(P0.01);2.石斛生物总碱3个剂量组的吸光度值均比模型组低,并减少LPS诱导的NO释放,均降低LPS所致的TNF-α、IL-6基因及蛋白的高表达(P0.05);3.石斛多糖3个剂量组对LPS诱导的NO释放具有改善作用(P0.05);石斛碱只有在高剂量时才能减少LPS诱导的NO释放。结论:1.石斛生物总碱能明显抑制LPS对星形胶质细胞的激活,减少炎性因子的释放,提示其具有神经保护作用;2.石斛多糖和石斛碱减少LPS诱导的NO释放,提示两者均可能是金钗石斛抗炎作用的主要有效成分。


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