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牛奶中抗生素残留的检测技术研究及贵阳地区牛奶中抗生素残留的调研

褚洪潮  
【摘要】:近20年来,抗生素在畜牧业生产中的应用日益广泛,因此,动物食品中的抗生素残留问题,是一个摆在人们面前的、不容回避的现实问题,必须引起高度的重视。青霉素类、四环素类、氯霉素类抗生素作为广谱抗菌剂,因其价格便宜、抗菌谱广、抗菌力强,除被作为饲料添加剂以维持畜禽的健康并加速其生长外,还被广泛应用于动物的各种传染性疾病的预防和治疗。这些抗生素的广泛使用,不可避免地会在动物食品中造成药物残留的问题,进而对消费者的健康造成潜在的威胁。 因此,建立牛奶中抗生素残留量的快速检测方法,加强对贵阳市市售牛奶中青霉素类、四环素类和氯霉素类抗生素残留量的监控,具有重要的现实意义。本文对贵阳地区市售各类乳品前处理方法以及乳品中青霉素类、四环素类抗生素和氯霉素类抗生素残留进行了方法学研究,结论如下: (1)本实验对不同种类的乳品中四环素类抗生素和氯霉素类抗生素残留的前处理方法进行探究。在样品处理的提取、净化、富集、以及测定四个方面进行条件优化,选取了以EDTA-2Na-Mcllvaine缓冲溶液为提取溶剂,正己烷净化,Waters Oasis HLB固相萃取柱富集纯化的前处理条件;色谱柱Diamonsil钻石C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0mL/min,检测波长为270nm的色谱条件,为最优的方案。 (2)实验建立了固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)法测定乳品中4种抗生素残留的检测方法,用EDTA-2Na-Mcllvaine缓冲溶液超声提取样品,上清液经正己烷萃取后,取无机相层,经WatersOasis HLB固相萃取柱富集净化,HPLC配紫外检测器进行测定,以外标法测定,对贵阳地区市售的9种品牌的乳品进行测定。结果表明:样品加标回收率在84.00%-93.70%,相对标准偏差1.03%-1.71%,样品的方法定量限为0.15-0.30μg/L,该方法简便快速,灵敏度高,适合于乳品中四环素类和氯霉素类抗生素的检测,能够满足实际样品分析。经检测,23个批次的乳品中均未检出四环素类和氯霉素类抗生素的原药残留。 (3)实验建立了高效液相色谱(HPLC)同时测定牛奶中阿莫西林和青霉素G的方法。牛奶样品用乙腈提取脱蛋白,离心取上清液,旋转蒸发干后,用磷酸二氢钾溶液溶解定容,经HYPERSEP C18固相萃取柱净化。以C18柱为分离柱,以乙腈和水为流动相,梯度洗脱。该方法采用外标法,在1.0ng/mL~100.0ng/mL范围内,青霉素G和阿莫西林的峰面积与对应的浓度成良好的线性关系(r=0.9995、0.9997)。加标回收率为89.25%~94.13%,相对标准偏差(RSD)分别为1.27%~1.43%(n=3)。该方法简便快捷,可适用于牛奶中阿莫西林和青霉素G的同时测定。


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