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中国西南地区淫羊藿属植物黄酮类物质研究

张万全  
【摘要】: 以原产贵州、四川等地的淫羊藿属(Epimedium L.)13个物种43个不同地方居群植物为材料,对淫羊藿属植物的总黄酮含量、黄酮组分含量、黄酮化学指纹、黄酮提取工艺、黄酮单体分离及其与牛血清白蛋白相互作用活性等进行了研究,目的是为淫羊藿属植物中药现代化研究提供指导。所得主要结果如下: (1)以紫外分光光度法测定了生长在相似条件下的淫羊藿属11种植物32群247个植株的总黄酮含量。11种淫羊藿的平均总黄酮含量是6.994%,种间变异大,变异系数为44.581%。平均总黄酮含量超过10%的淫羊藿仅1种,含量在5-10%的有6种,含量低于5%的有4种。研究还发现,粗毛淫羊藿和柔毛淫羊藿不同季节之间总黄酮含量有显著差异,且表现出相同的变化规律:9月>7月>3月>5月。 (2)考虑提取次数、乙醇含量、溶剂用量(料液比)、pH值四个因素,研究了粗毛淫羊藿的冷浸提取工艺。结果表明,影响提取效果的首要因素是提取次数。以总黄酮的获得量为标准,最佳工艺条件是15倍量80%乙醇不加碱提取2次。以淫羊藿苷获得量为标准,最佳工艺条件是:20倍量60%乙醇不加碱提取2次。 (3)通过硅胶柱层析和葡聚糖凝胶柱层析,从粗毛淫羊藿提取物中分离出6个黄酮成分,经ESI-MS,~1H NMR和~(13)C NMR谱鉴定,它们是:淫羊藿苷,淫羊藿次苷Ⅱ,2″-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ,大花淫羊藿苷B,脱水淫羊藿素,4″-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ。 (4)用RP-HPLC法测定了生长在相似条件下的淫羊藿属13种植物40个植株的淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ、2″-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、大花淫羊藿苷B、脱水淫羊藿素、4″-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ等6种黄酮成分的含量。淫羊藿苷的含量普遍较高,其它5种黄酮成分的含量普遍很低。以各种植物的6种黄酮成分的平均含量为标准用最短距离法进行聚类分析,可把13种淫羊藿分为5类。 (5)对10批次不同来源的黔产粗毛淫羊藿的HPLC图谱进行分析,得到共有峰10个。5号峰为淫羊藿苷,7号峰为4″-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ,8号峰为淫羊藿次苷Ⅱ。2、3、4号峰,不能直接指认,根据文献分析,极有可能是朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C。1、6、9、10号峰为未知峰。 (6)在室温下,用淫羊藿苷、大花淫羊藿苷B、4″-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿次苷Ⅱ等四种黄酮成分分别对牛血清白蛋白溶液进行荧光滴定实验。结果发现这4种黄酮成分都能牛血清白蛋白猝灭的荧光。


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