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云南栘衣有效成分提取纯化工艺的研究

彭珍华  
【摘要】:云南杉衣是云南特有的野生水果,其营养成份含量丰富。目前对杉衣有效生物活性成分的研究很少。国内外对杉衣有效成分的提取分离纯化工艺未见任何系统的报导。因此,本文对其提取、纯化工艺和抗氧化活性进行初步研究,为今后杉衣资源的综合利用和开发奠定基础。本文系统地研究了比色法测定云南杉衣(以下简称杉衣)多种有效成分含量的方法;用正交设计法优选了杉衣总黄酮和总皂苷的超声波提取工艺条件;研究了D101大孔吸附树脂富集、纯化杉衣总皂苷的适宜的吸附和解吸附性能和洗脱参数等。其研究的主要结果如下: 1、通过鉴别实验,证实了移衣中含有生物碱、皂苷、糖、黄酮、强心苷等多种有效成分。 2、确定了测定杉衣多种有效成分含量的比色-紫外分光光度法:以齐墩果酸为对照,香草醛-高氯酸显色,556 nm波长处测定吸光度,移衣总皂苷含量的标准曲线方程为A=67.73 C-0.002;以槲皮素为对照,256 nm波长处测定吸光度,杉衣总黄酮含量的标准曲线方程为A=89.46 C-0.007;以葡萄糖为对照,苯酚-浓硫酸显色,在448nm波长处测定吸光度,移衣总糖含量的标准曲线方程为A=0.016 C+0.001。齐墩果酸的含量为0.169%,总皂苷的含量为1.717%,总黄酮的含量为1.478%,总糖含量为41%。 3、研究了杉衣总黄酮和总皂苷的超声波提取工艺,在单因子实验的基础上,采用L9(33)正交实验确定了乙醇提取杉衣总皂苷的适宜工艺参数:超声波的超声功率为200 W,加热功率为800 W,提取次数2次、每次提取时间0.5 h,提取剂乙醇浓度为90%,固液比为1:15;乙醇提取移衣总黄酮的适宜工艺参数:超声波的超声功率为200 W,加热功率为800 W,提取次数2次、每次提取时间0.5 h,提取剂乙醇浓度为80%,固液比为1:15。 4、探讨了大孔吸附树脂法对杉衣总皂苷分离纯化的影响。实验研究和分析了D101大孔树脂对杉衣总皂苷的吸附和解析性能。结果表明:D101大孔树脂适于杉衣总皂苷的分离和精制,确定了大孔吸附树脂纯化杉衣总皂苷的适宜条件:pH值为3,温度在25~35℃,皂苷浓度为6.45 mg/mL的上样液20 mL以1 BV/h的流速通过18.00 g D101大孔吸附树脂的树脂柱(d=1.4 cm,h=20 cm),进行动态吸附后,用30%的乙醇以2 BV/h的流速进行洗脱。纯化率为40.01%,回收率为54.9%。 5、用优化的工艺流程提取分离杉衣总皂苷并做了抗氧化活性的测定,对羟基自由基的50%清除浓度CC50为0.1569 mg/ml;对超氧化物阴离子自由基的50%清除浓度CC50为0.8685 mg/ml。 综上所述,采取乙醇超声波提取、大孔吸附树脂吸附等工艺技术可以有效的提高总皂苷的的提取分离效率。超声提取的优点是提取时间少,得率高。D101树脂吸附性能较好,确定的工艺参数可为以后的工业化开发提供依据。


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