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银杏叶提取物对过氧化氢诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

温海滨  
【摘要】:目的通过过氧化氢(H_2O_2)诱导大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)建立氧化损伤模型,观察银杏叶提取物(EGB761)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)氧化损伤的保护作用,研究EGB761对大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。 方法体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白、过氧化氢诱导组、不同剂量的EGB761保护组,选择400μmol/l H_2O_2作用24小时作为损伤模型剂量,并给予不同浓度EGB761保护,检测SOD数值,观察细胞损伤情况,MTT法观察细胞的活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Survivin,Caspase-3基因mRNA的表达。 结果1、与对照组相比,100-400μmol/l范围内过氧化氢(H_2O_2)对大鼠肾小管上皮细胞均有明显的损伤作用,SOD值明显降低(P0.05),均能诱导大鼠肾小管上皮细胞氧化损伤,MTT发现细胞活性降低(P0.05),流式检测细胞凋亡率增加(P0.05)。RT-PCR观察Survivin mRNA表达变化不显著(P0.05),Caspase-3 mRNA表达上调(P0.05)。2、与400μmol/l过氧化氢诱导组相比,SOD值上升(P0.05),MTT示细胞活性增加(P0.05),流式检测示细胞凋亡率降低(P0.05),RT-PCR观察SurvivinmRNA表达上调(P0.05),Caspase-3 mRNA表达下调(P0.05)。 结论1、过氧化氢(H_2O_2)在100-400μmol/l范围内可诱导大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)凋亡;2、EGB761对过氧化氢(H_2O_2)诱导大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)凋亡有保护作用;3、EGB761可能是通过以下机制对H_2O_2诱导的NRK52E细胞氧化损伤发挥保护作用;①EGB761可通过提高机体抗自由基的能力对肾缺血再灌注大鼠发挥保护作用。②EGB761通过上调NRK52E细胞Survivin的表达,下调Casepase-3的表达,抑制肾小管上皮细胞凋亡,从而减轻NRK52E细胞损伤。


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