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血管新生抑制活性为导向的云南鼠尾草化学成分研究

张林东  
【摘要】:云南鼠尾草(Salvia yunnanensis C.H. Wright),又名丹参、紫丹参、红参、山槟榔、小红草乌、小红党参、紫参、小槟榔、奔马草、朱砂理肺散。多年生草本。分布于四川西南部,云南西北部及西藏东南部。在云南多作为丹参代用品,多以根部入药。云南鼠尾草与丹参具有相似的药理活性,但是对于其化学成分的研究却并不深入,在本论文中对其展开了血管新生抑制活性指导下的化学成分研究,主要得到以下研究结果: 1、提取物柱层析极性部位鸡胚尿囊膜血管新生抑制活性筛选:对云南鼠尾草地下部分划段部位石油醚/乙酸乙酯9:1、8:2、2:1、1:1、1:2和云南鼠尾草地上部分划段部位石油醚/乙酸乙酯9:1、7:3、1:1利用鸡胚尿囊膜血管新生模型进行活性测试,得到云南鼠尾草地下部分划段部位9:1、1:1具有明显的血管新生抑制活性,8:2、1:2表现出明显的血管新生促进活性,2:1没有表现出明显的血管新生抑制或促进活性,云南鼠尾草地上部分提取物柱层析划段部位9:1部分表现出一定的血管抑制活性,1:1部分表现出明显的血管生成抑制活性,7:3部分表现出明显的血管新生促进活性,结合实验结果,加之本课题组另有其他成员在展开活性指导下的甘西鼠尾草化学成分的分离工作,考虑云南鼠尾草与甘西鼠尾草中为同属植物化学成分具有一定的相似性,从而在云南鼠尾草地下部分中选择9:1,8:2部分展开化学成分研究,而对云南鼠尾草地上部分9:1,1:1部分展开分离。 2、云南鼠尾草地下和地上部分化学成分的分离:结合第二章结果从云南鼠尾草中分离得到22个化合物,其中从地下部分9:1,8:2部分分离得到丹参酮Ⅰ(tanshinone Ⅰ),丹参内酯(tanshinlactone),丹参酮IIA (tanshinone IIA),丹参新醌B (Danshenxinkun B),次甲丹参醌(Methylenetanshinquinone),1,2-二氢丹参酮Ⅰ(1,2-Dihydrotanshinone Ⅰ),5,6-脱氢柳杉酚(5,6-Dehydrosugiol),6α-羟基柳杉酚(6a-hydroxysugiol),柳杉醇(sugiol),化合物10(甾醇),化合物11(未知),隐丹参酮(Crypotanshinone),二氢丹参酮(Dihydrotanshinone Ⅰ),化合物14(未知)共14个已知化合物,。地上部分(茎叶)9:1,1:1部分分离得到(+)Spathulenol,3β-Hydroxy-12-ursene,β-Amyrin,丹参内酯(tanshinlactone),5,7,4'-Trihydroxyflavanone,马斯里酸(2α,3β-dihydroxyursa-12-en-28-oic acid), Ursolic Acid,3-Oxo-12-ursen-28-oic acid共8个化合物。 3、单体化合物鸡胚尿囊膜血管新生抑制活性筛选:以鸡胚尿囊膜血管新生抑制模型进行实验,对分离所得丹参酮Ⅰ(Y-1),丹参内酯(Y-2),丹参酮ⅡA(Y-3),丹参新醌B(Y-4),5,6-脱氢柳杉酚(Y-5),6α-羟基柳杉酚(Y-6),柳杉醇(Y-7),隐丹参酮(Y-8),二氢丹参酮(Y-9),化合物14(Y-10),(+)Spathulenol(Y-11),3β-Hydroxy-12-ursene(Y-12),(3-Amyrin(Y-13),马斯里酸(2α,3β-dihydroxyursa-12-en-28-oic acid)(Y-14), Ursolic Acid(Y-15)进行活性测试筛选出具有一定活性的7个化合物丹参内酯(Y-2),丹参酮ⅡA(Y-3),6α-羟基柳杉酚(Y-6),柳杉醇(Y-7),隐丹参酮(Y-8),化合物14(Y-10),马斯里酸(2α,3β-dihydroxyursa-12-en-28-oic acid)(Y-14),其中血管新生抑制活性强弱依次为Y-14Y-2Y-3≈Y-6≈Y-7Y-10Y-8。 4、柱切换HPLC法分析四种鼠尾草属植物中化学成分:对4种鼠尾草属植物(丹参,云南鼠尾草,甘西鼠尾草,栗色鼠尾草)中7种成分通过柱切换HPLC法进行定量研究,结果显示在4种植物中4种水溶性成分除咖啡酸外,含量均为丹参云南鼠尾草甘西鼠尾草栗色鼠尾草,云南鼠尾草中部分水溶性成分含量与丹参药材相当,脂溶性成分含量云南鼠尾草除丹参酮Ⅰ高于正品丹参外,丹参酮ⅡA和隐丹参酮含量均与正品丹参相当,而甘西鼠尾草和栗色鼠尾草由于水溶性成分含量较低,而脂溶性三种成分均远高于正品丹参药材。 结论:通过对云南鼠尾草提取物进行分离,共分离得到22个化合物,其中有7个具有预期的血管抑制活性药理活性,与正品丹参相比,云南鼠尾草,甘西鼠尾草,栗色鼠尾草在化学成分上相似,在含量上有所差异,在作为丹参代用品使用时,应该选择性的使用。


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