收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

基于成分敲出/敲入的中药(黄连)药效物质辨识和质量控制模式的研究

李俊贤  
【摘要】:中药的药效物质辨识与质量控制研究一直是中医药研究的重点,也是影响中医药现代化发展的关键问题。为了准确地、快速地找出药效物质,更好地控制中药的质量,本文借用成分敲出/敲入的思想,针对黄连的药效物质辨识和质量控制模式进行研究,建立了一套完善的黄连抗菌(痢疾杆菌Shigella dysenteriae)的药效物质研究及质量控制的模式。 主要研究内容和结果如下: (1)不同来源、品种的黄连生物碱成分含量波动较大 采用HPLC分析不同来源、品种的黄连水提物中主要生物碱成分含量信息。结果显示:黄连各生物碱的含量存在显著差异,且不同品种的黄连中总生物碱含量也呈较明显的品种性差异。 (2)化学分析法与生物活性检测法联用,有助于药效物质的发现 采用HPLC法测定了3个品种、6个浓度共18个黄连样品的化学信息;采用微量量热法比较各黄连样品对痢疾杆菌生长代谢的影响,并用主成分分析法对所有样品的生物热活性参数进行分析。结果发现:3种黄连抑菌效果存在明显差异,抑菌活性以云连最强,味连次之,雅连最弱。用典型相关分析法分析化学指纹谱信息与生物指纹图谱信息,结果显示:与抑菌活性存在密切的相关性化学成分是小檗碱(Ber)、黄连碱(Cop)、药根碱(Jat)、巴马汀(Pal),与药典所规定的黄连指标性成分一致。 (3)通过黄连各成分逐一敲出,筛选出了黄连中主要的抗菌药效物质 利用TLC对黄连样品进行分离,确定6个需要“敲出”的目标成分是:非洲防己碱(Col)、Jat、表小檗碱(Epi)、Ber、Pal、Cop;采用UPLC-MS对“敲出”成分及其阴性样品进行鉴定,评价“敲出”工作的彻底性及检测“敲出”前后各物质成分是否发生变化。结果显示:各敲出目标成分均被很好的分离出来,阴性样品中无残留;各目标成分敲出前后的离子碎片相同,说明TLC分离没有破坏各目标成分的化学结构。 利用微量量热法考察与评价同浓度各敲出目标成分抑制活性强弱顺序为:Cop Ber Epi Jat+Col Pal非生物碱部分;在黄连水提液自然配比下,6种生物碱对痢疾杆菌生长代谢均有一定的抑制作用,且以黄连碱与小檗碱的抑菌活性最强。考察各敲出成分间的作用关系发现非生物碱部分对黄连的抑菌活性有一定的拮抗作用;比较6种生物碱间的相互作用发现小檗碱与黄连碱存在协同作用,而叠加作用存在于其他4种生物碱与小檗碱和黄连碱的药物活性之间。 (4)通过已确定的关键药效物质的敲入,确定了黄连药效物质的含量限度 将已确定的小檗碱和黄连碱“递增敲入”到各阴性样品中,采用HPLC和热动力学分析法对不同浓度的“敲入”样品进行化学分析与生物活性评价,初步制定小檗碱和黄连碱适宜的范围为8.08%-31.92%和4.05%-14.45%。 (5)确定小檗碱和黄连碱的最佳剂量配比,为黄连“组分中药”的研制提供新思路和路径 采用棋盘法设计,荧光吸收法来评价黄连碱与小檗碱不同配比作用下的抑菌活性强弱,找出了黄连碱与小檗碱的最佳剂量配比为2:1,相对较优配比为:4:1,1:2,1:4。 本研究利用成分敲出/敲入的研究模式,初步建立黄连的药效物质的筛选模式与质量控制模式,并发现黄连主要的抗痢疾杆菌的药效物质,制定出其含量限度范围及其最佳剂量配比,为黄连的质量控制标准的进一步发展和完善提供参考,同时也为未来中药的重点的研究方向——药效物质辨识和质量控制研究提供了新的研究思路与方法。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 袁久荣;魏英勤;袁浩;徐娟;容蓉;;RP-HPLC法同时测定黄连中四种原小檗碱型生物碱的含量[J];世界科学技术-中医药现代化;2006年06期
2 陈军辉;赵恒强;李文龙;王小如;黎先春;杨黄浩;;高效毛细管电泳-电喷雾飞行时间质谱联用分析黄连中的生物碱[J];化学学报;2007年23期
3 贺玉琢;;黄连中的异喹啉生物碱黄连碱选择性抑制血管平滑肌细胞增殖的作用机制[J];国际中医中药杂志;2006年02期
4 应懿;何志红;周世文;汤建林;黄永平;杨雪;;正交试验优化提取黄连中小檗碱型生物碱[J];中国药房;2007年09期
5 李恩来;朱慧;潘秀芳;;黄连的临床应用和注意事项[J];中医药临床杂志;2008年05期
6 利健文;蔡沛祥;;毛细管电泳安培法检测黄连中的生物碱[J];化学研究与应用;2009年10期
7 李彩虹;周克元;;黄连活性成分的作用及机制研究进展[J];时珍国医国药;2010年02期
8 刘峰;张振秋;赵金明;丁广宇;李力;;黄连及炮制品HPLC指纹图谱研究[J];中药材;2010年09期
9 张瑞芬;苏和;;黄连的药理研究进展[J];内蒙古中医药;2010年03期
10 阁;;国产黄连5种生物碱的含量测定[J];江西中医药;1990年03期
11 山田阳城;周德文;;黄连的药理和药效[J];国外医药.植物药分册;1993年02期
12 彭锐;李隆云;;黄连药材质量评价方法探索和质量与环境因素相关性研究[J];重庆中草药研究;2007年02期
13 周嘉裕;彭书明;雷泞菲;廖海;陈放;;黄连N-甲基乌药碱-3′-羟化酶基因的克隆及序列分析[J];中草药;2008年03期
14 俞森;俞蕴莉;卢守四;刘李;刘晓东;;黄连中5种小檗碱型生物碱在糖尿病大鼠体内的药动学[J];中国药科大学学报;2008年06期
15 李佳川;孟宪丽;范昕建;赖先荣;张艺;曾勇;;黄连改善胰岛素抵抗药效物质基础研究[J];中国中药杂志;2010年14期
16 陈帅;童元峰;吴松;;盐酸黄连碱的全合成[J];合成化学;2009年04期
17 颜玉贞,林巧玲,谢培山;黄连薄层指纹图谱研究[J];中国中药杂志;1993年06期
18 何文智;蔡光先;熊艾君;刘柏炎;;黄连对脑缺血再灌注损伤大鼠血清CRP、IL-1β含量动态变化的影响[J];湖南中医杂志;2007年04期
19 李亚梅;叶小利;李雪梅;褚浩锋;刘国印;朱炎;陈新;周家洲;李学刚;;助剂对小鼠吸收黄连总生物碱的影响及药代动力学的研究[J];中国中药杂志;2009年03期
20 王道武;庞雪;赵全成;张龙;;微波辅助提取黄连生物碱及其毛细管电泳分析[J];广东化工;2010年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 沈晓庆;降雪;贾天柱;;黄连的研究进展[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
2 魏清;;黄连的临床应用[A];2011年全国医药学术论坛交流会暨临床药学与药学服务研究进展培训班论文集[C];2011年
3 张海;李佳川;孟宪丽;周小玲;;黄连碱对3T3-L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响[A];第十一届全国中药药理学术大会论文摘要[C];2010年
4 祝晨陈;;CAMAG薄层应用报告 黄连药材薄层色谱指纹图谱鉴别[A];纪念《元亨疗马集》付梓400周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2008年学术年会华东区第十八次中兽医科研协作与学术研讨会暨兽药发展论坛论文集[C];2008年
5 张伯礼;高秀梅;商洪才;赵宜军;王永炎;;复方丹参方的药效物质及作用机理研究[A];中医药优秀论文选(下)[C];2009年
6 刘和平;王祥红;;黄连薄层色谱鉴别方法的改进与《中国兽药典》商榷[A];纪念中国畜牧兽医学会中兽医学分会成立30周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2009年学术年会、华东区第十九次中兽医科研协作与学术研讨会论文集[C];2009年
7 汤建林;刘智远;刘明;胡岚岚;;HPLC-ELDS测定黄连中黄连碱含量[A];重庆市化学化工学会2009学术年会论文集[C];2009年
8 孟杰;;复方田七胃痛胶囊药效物质及作用机理研究[A];中华中医药学会脾胃病分会第十八次学术交流会论文汇编[C];2006年
9 张新峰;裘福荣;蒋健;高成璐;;左金丸类方的小檗碱、巴马汀、黄连碱和药根碱在Caco-2细胞转运的比较研究[A];第十次全国中医药传承创新与发展学术交流会暨第二届全国中医药博士生优秀论文颁奖会议论文集[C];2011年
10 李澎涛;罗国安;潘彦舒;王义明;朱陵群;王硕仁;曹进;李传云;梁琼麟;张娜;肖盛元;朱晓磊;饶毅;贾旭;严诗楷;;清开灵注射液多环节阻抑脑缺血级联反应药效物质与作用机理研究[A];中医药优秀论文选(下)[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 蒋小飞;8-烷基黄连碱同系物的合成与药理活性[D];西南大学;2011年
2 陈西平;影响黄连在复方中功效发挥方向的多因素研究[D];成都中医药大学;2011年
3 时丽丽;丹酚酸A、黄连碱对糖代谢的作用及机制研究[D];北京协和医学院;2011年
4 陈红英;黄连化学成分的分离及其降糖活性研究[D];西南大学;2012年
5 李佳川;基于本草知识的酒蒸黄连“止消渴”系统研究[D];成都中医药大学;2011年
6 吴金凤;黄连生物碱降低卷烟烟气中有害成分的作用及机理研究[D];西南大学;2012年
7 张春平;不同外源物质提高盐胁迫下黄连种子及幼苗抗逆性机理研究[D];西南大学;2012年
8 田金凤;玄参和黄连的化学成分分离及其生物活性研究[D];西南大学;2013年
9 李秀玲;精制血府逐瘀复方配伍的药效物质基础研究[D];中国科学院研究生院(大连化学物理研究所);2003年
10 柯贵珍;天然植物黄连提取物的染色性及其功能性[D];东华大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李俊贤;基于成分敲出/敲入的中药(黄连)药效物质辨识和质量控制模式的研究[D];昆明理工大学;2013年
2 庞雪;基于相似结构特征的黄连混合生物碱转化为单体黄连碱的研究[D];长春工业大学;2011年
3 张海;黄连碱体外抗炎作用及其机制研究[D];成都中医药大学;2012年
4 陈军;不同光照对黄连质量和产量的影响[D];西北农林科技大学;2011年
5 周源;黄连降糖作用在糖尿病治疗中的应用与思考[D];北京中医药大学;2011年
6 王婷婷;黄连、连翘协同抑菌配方优化及保鲜应用研究[D];山东农业大学;2011年
7 侯艺辉;黄连等药材质量评价指标与配伍组分的对应性研究[D];北京中医药大学;2012年
8 刘婷;黄连叶片与须根中小檗碱的提取纯化研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 宁娜;酶法辅助提取黄连生物碱的研究[D];天津医科大学;2009年
10 田佳;复方中药药效物质基础研究[D];沈阳药科大学;2002年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 梁光义 贺祝英;中药现代化与药效物质研究[N];中药报;2000年
2 彭尧;黄连价格的超前预测[N];中国医药报;2008年
3 记者刘道安;复方丹参方药效物质及作用机理研究通过鉴定[N];中国中医药报;2002年
4 暨南大学医学院 赵国平钱三旗 湖南中医药大学 何清湖;中药复方药效物质研究的思路与方法[N];中国中医药报;2007年
5 金永生;控制饮片质量是保证疗效的关键[N];中国中医药报;2006年
6 ;新技术在药效物质基础研究中的应用[N];中国医药报;2005年
7 张世臣;落实质量标准是中药走向世界的保障[N];中国医药报;2000年
8 赵 雯;探索方剂关键科学问题 开拓组分配伍研制新药[N];中国中医药报;2005年
9 ;完善质量标准 推动中药国际化[N];中国中医药报;2001年
10 张贵君;现代中药研究的定位之误[N];中国医药报;2006年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978