收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

颈脊髓空洞症时骶棘肌失神经支配、脑脊液流动性改变与胸椎侧凸的相关性研究

王迎松  
【摘要】:目的: 1.在化学致炎剂Kaolin诱导的非交通性颈脊髓空洞伴发胸椎侧凸兔模型基础上,针对侧凸发生早期的关键时相点,重点关注顶椎区脊柱两侧椎旁肌内的变化,分别从运动神经终末分支、神经肌肉接头受体表达和肌纤维形态的角度,分析骶棘肌失神经支配的不平衡是否为颈脊髓空洞所伴发胸椎侧凸的主要原因; 2.采用脑脊液糖蛋白示踪和核磁共振流体定量技术,探讨脑脊液在脊髓血管周围间隙及蛛网膜下腔流动特性的改变与脊髓空洞、脊柱侧凸发生和演变间的相互影响; 3.通过探索颈脊髓空洞症时骶棘肌失神经支配、脑脊液流动性改变与胸椎侧凸的相关性,为逐步深入研究颈脊髓空洞与伴发胸椎侧凸间的因果联系建立基础。 方法: 第一部分Kaolin诱导兔非交通性颈脊髓空洞伴发胸椎侧凸新型模型的构建 1.动物分组:以46只日本大耳白兔,随机分为假手术组(8只)、生理盐水组(8只)和实验模型组(30只);2.建模:假手术组建模以2%戊巴比妥钠10-15mg/kg静脉麻醉,经后路显露颈7椎板后,切除0.3-0.4cm2椎板,以微量注射器自硬膜囊后正中旁开左侧lmm穿刺,深度1.0-1.5mm,维持针头位置3分钟后缓慢退针:生理盐水组建模则在上述穿刺后,以60μl生理盐水于2分钟内缓慢推注,并维持针头位置1分钟后缓慢退针;实验模型组建模以等量25%Kaolin液替代生理盐水行推注。3.观察:于术前、术后3天、2周、4周、8周时分别行改良的Tarlov评分以评估兔的肢体运动功能;4.脊髓空洞的检测:分别于术后4周、6周、8周及12周,以1.5T超导核磁共振仪于TR/TE值230/26ms、8000/264ms条件下,行兔颈脊髓矢状位和颈1-胸6轴位扫描,动态观察颈脊髓空洞的发生和进展情况;分别于术后6周、8周、12周时在MRI显示空洞的动物中随机选择1只动物,经左心4%多聚甲醛灌注处死后,在颈脊髓穿刺区及空洞区轴位切片,苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin, HE)染色,×100光镜下观察中央管、室管膜及其周围脊髓实质的变化;5.胸椎侧凸的检测:分别于术后4周、6周、8周、10周及12周,以数字减影x线摄片机摄脊柱正位片。记录发生的侧凸形态,并以Cobb法测量侧凸角度; 第二部分兔非交通性颈脊髓空洞伴发胸段侧凸早期椎旁骶棘肌失神经支配的对称性的研究 1.动物分组:第一部分实验造模的20只日本大耳白兔,依MRI及x线检测到畸形的状态不同分为无侧凸或空洞发生的对照组(8只)、单纯空洞组(3只)和侧凸组(9只)。2.取材:在侧凸被检测到第2或4周时相点,于胸8节段或主弯顶椎区,左右两侧对称切取0.5x0.5x3.0cm3椎旁骶棘肌;3.肌纤维结构观察:HE染色×100-200光镜下观察肌纤维的肌源性及神经源性病变,并以扫描电镜观察椎旁肌失神经支配的超微结构变化;4.运动神经终末分支观察:椎旁肌运动终板神经镀银染色,统计并计算轴突终末支配比率(Terminal innervation ratio,TIR);5.神经肌肉接头受体表达检测:针对椎旁肌神经肌肉接头突触后膜乙酰胆碱受体(Acetylcholine receptor, AChR)γ亚基表达水平进行检测,在总RNA提取后,分别行浓度和纯度测定,继以总RNA为模板进行cDNA第一链合成,再以ABI荧光定量PCR仪7000型,采用SYBR GREEN法相对定量检测目的基因表达,计算2-ΔΔCT值;6.所有检测结果均行凸凹侧对比。 第三部分兔非交通性颈脊髓空洞伴发胸椎侧凸早期脊髓内脑脊液糖蛋白迁移的示踪观察 1.动物分组:第一部分实验造模的20只日本大耳白兔,以MRI及x线检测到畸形的状态不同分为无侧凸或空洞发生的对照组(8只)、单纯空洞组(3只)和侧凸组(9只)。2.枕大池穿刺注射生理性示踪剂辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP):在侧凸被检测到第2或4周时相点,分别行经皮枕大池穿刺,3%HRP计500μl于2分钟内缓慢注入蛛网膜下腔(Subarachnoid space, SAS);3.检测:推注完成后10分钟,采用4%多聚甲醛快速脊髓灌注,颈段脊髓取材并切片,二氨基联苯胺(3,3'-diaminobenzidine, DAB)显色,于×100-200光镜下观察脑脊液(Cerebrospinal fluid,CSF)经脊髓血管周围间隙(Perivascular spaces,PVS)向脊髓实质内的迁移范围及分布。 第四部分:经后路全脊椎切除术对颈脊髓空洞伴发脊柱侧凸青少年患者脑脊液动力学影响的研究 1.研究对象分组:23例研究对象,包括正常对照组(10例)、单纯空洞组(5例)和伴发有脊髓空洞的脊柱侧凸组(8例);2.检测:所有研究对象均采用同步心电门控下相位对比电影磁共振(Phase Contrast cine Magnetic Resonance Image,PC-cine MRI)技术,行SAS内CSF流体动力学参数测定。以1.5T超导核磁共振仪于TR/TE值32-50/6.9 ms和75/16ms条件下正中矢状位及轴位扫描;分别取轴位的枕骨大孔、颈7、胸7(或顶椎)和腰1椎体中份水平进行测定;使用Argus流动分析软件,测量及计算参数包括:CSF从头端流向尾端时相的持续时间(DF)、从尾端流向头端时相的持续时间(UF)、DF/一次循环时间(DF%),UF/一次循环时间(UF%)、DF起始时间/一次CSF循环时间(DS%)、潜伏期/一次CSF循环时间(SP%)、CSF向下流动最大流速(VDmax)、向上流动最大流速(VUmax);绘制最大流速/时间曲线;行组间比较;3.干预:脊柱侧凸组均未行枕颈区神经减压而选择一期经后路全脊椎切除(Posterior vertebral column resection,PVCR)脊柱短缩矫形术;4.干预后检测:术后3周再次行枕骨大孔、颈7的PC-cine MRI检测,并与术前比较。统计学分析以SPSS11.0软件进行统计学分析。计量资料组间比较以成组t检验,组内比较以配对t检验;选择P0.05为有统计学差异。结果:1.第一部分1.实验模型组动物有3只于术后2周内死亡;6只自造模后2周起逐渐出现后肢无力、活动受限,至术后8周Tarlov评分2.50;2.在18只持续观察12周的模型兔中,于造模后第6周开始出现颈脊髓空洞,不伴脑积水或第四脑室扩张,至12周时发生率66.7%;3.造模后第8周开始发生胸椎侧凸,至12周时发生率50.0%,平均Cobb角35.09°±13.22°(18°-68°);4.随时间推移,空洞直径逐渐增大;所有侧凸均与脊髓空洞伴发,侧凸分别在MRI显示脊髓空洞发生的同时(2只)、2周后(5只)及4周后(2只)被观察到;侧凸类似临床常见的脊髓空洞伴发的侧凸形态;随时间推移,侧凸角度逐渐增大。5.其余2组未检测到空洞或侧凸发生。 2.第二部分1.侧凸组动物在侧凸发生早期存在椎旁肌失神经支配表现,以肌纤维角状萎缩及亚细胞结构紊乱、运动终板轴突末梢分支增加、及突触后膜AChR的γ亚基表达上调等为特征;2.侧凸组动物凸凹侧对比差异均不明显,包括光镜及电镜下肌纤维的结构、TIR值(凸侧1.14±0.18,凹侧1.17±0.36)和2-ΔΔCT值(凸侧1.628±0.002,凹侧1.729±0.003)。 3.第三部分所有动物均观察到在颈脊髓PVS内有HRP反应产物的聚集;在正常对照组动物HRP反应产物主要位于背侧脊髓白质;单纯空洞组动物可见明显的灰质内扩散;侧凸组动物表现为PVS增宽,中央灰质和腹、背侧白质内的HRP反应产物广泛分布,且HRP反应产物具有中央管趋向性。 4.第四部分1.PC-cine MRI结果显示,颈脊髓空洞患者的CSF动力学表现为有特征性的低动力学特点,由颅内向椎管内流动受阻;2.伴发脊柱侧凸时,在枕骨大孔区向下流动的低动力表现更为明显;在颈脊髓平面有显著的向下流动起始延迟;在顶椎区则表现了高动力学特点;3.行PVCR脊柱矫形术后3周与术前相比,在颅颈交界区的CSF动力学由异常而转为趋近于正常;术后随访可观察到脊髓空洞缩小现象。 结论: 1.于颈7脊柱节段相应脊髓实质内注射Kaolin,诱导了兔非交通性颈脊髓空洞形成,同时观察到胸段结构性、进展性脊柱侧凸的发生。该动物模型与临床接近,构建操作简单,验证手段成熟;为进一步有关脊髓空洞伴发脊柱侧凸的动物研究提供了较为理想的平台。 2.尽管在畸形发生早期存在椎旁骶棘肌的失神经支配情况,但空洞伴发的脊柱侧凸不一定源于双侧不平衡的神经支配,应有其他病理机制的参与。 3.兔胸段脊柱侧凸发生早期,CSF经颈段脊髓PVS途径向空洞内流入明显增加。CSF经PVS的动力学改变影响了脊髓空洞的发生及发展,脊柱侧凸又加剧了兔颈段脊髓内CSF动力学改变。 4.首次对脊髓空洞伴发脊柱侧凸的患者SAS内的CSF动力学参数进行对比研究。脊髓空洞患者存在颅颈交界区CSF动力学障碍;伴发脊柱侧凸时,脊髓牵张使颅颈交界区CSF循环的梗阻加重,对空洞的发生和发展产生影响。 5.首次对伴发脊髓空洞的脊柱侧凸患者未行枕颈区神经减压而行一期脊柱短缩矫形PVCR术。PVCR术在获得有效脊柱畸形矫正的同时,通过缓解脊髓牵张,改善了颅颈交界区CSF动力学障碍,有利于脊髓空洞的缩小


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 邱勇;;特发性胸椎脊柱侧凸矫形椎弓根螺钉误置的危险因素[J];脊柱外科杂志;2010年02期
2 马维虎;孙韶华;徐荣明;阮永平;黄雷;应江炜;蒋伟宇;;全椎弓根螺钉技术治疗特发性脊柱侧凸[J];中国骨伤;2008年06期
3 郝定均;贺宝荣;吴起宁;王晓东;贺增良;刘团江;;全椎弓根螺钉系统矫正特发性脊柱侧凸[J];中国矫形外科杂志;2007年21期
4 朱泽章;邱勇;王斌;俞杨;钱邦平;朱锋;;胸椎侧凸后路凸侧胸廓成形术后胸腔并发症及其预防[J];中国骨伤;2008年04期
5 殷海东;黄明光;黄东生;彭焰;杜开利;杜庆钧;;个体化置钉技术治疗Lenke Ⅰ型脊柱侧凸[J];中国矫形外科杂志;2010年11期
6 李明;许明;刘洋;朱晓东;宋元进;张琪;顾苏熙;;徒手胸椎椎弓根螺钉置入技术治疗青少年特发性脊柱侧凸的安全性评价[J];脊柱外科杂志;2005年04期
7 周跃;海涌;陈晓明;鲁世保;康南;;胸腰段特发性脊柱侧凸的前路矫正术[J];脊柱外科杂志;2007年05期
8 杨建东,沈康平;胸椎动脉瘤样骨囊肿致脊柱侧凸1例报告[J];脊柱外科杂志;2003年01期
9 戴力扬;特发性左侧胸椎侧凸[J];中国矫形外科杂志;2001年05期
10 海涌;有关特发性脊柱侧凸的外科动态[J];中国脊柱脊髓杂志;2003年05期
11 朱锋,邱勇;生长发育异常和青少年特发性脊柱侧凸[J];脊柱外科杂志;2003年04期
12 贺永雄,邱勇,王斌;脊柱侧凸患者胸主动脉与相邻椎体的解剖关系及临床意义[J];中国脊柱脊髓杂志;2004年07期
13 马华松;周建伟;邹德威;邵水霖;王晓平;谭荣;张墨;;极重度脊柱侧凸的二期手术治疗[J];脊柱外科杂志;2007年06期
14 梁建情;手法治疗“S”型特发性脊柱侧凸一例[J];广西中医药;2000年06期
15 王延宙,房庆敏;青少年特发性脊柱侧凸的手术治疗[J];山东医药;2002年12期
16 刘洋,李明,倪春鸿,朱晓东,白玉树,赵新刚;胸椎椎弓根螺钉技术在青少年特发性脊柱侧凸矫治中的应用[J];脊柱外科杂志;2004年05期
17 刘一,齐欣,张绍昆,苗巍巍,宋之明;非影像监视下行脊柱侧凸胸椎椎弓根螺钉置入的临床应用[J];中国脊柱脊髓杂志;2005年04期
18 张宏志;张永刚;张雪松;毛克亚;王岩;;后路选择性融合治疗青少年特发性脊柱侧凸单胸弯[J];中华医学杂志;2007年09期
19 张蜀华,马景昆,赵雪峰,胡世宝,张淑逵,肖德富,张建忠,朱向东;一种新型的脊柱侧凸多维矫正系统[J];山西医科大学学报;1994年03期
20 邱勇;杨子明;;国际脊柱侧凸研究学会第42届年会扫描[J];中华外科杂志;2007年24期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郝定均;贺宝荣;吴起宁;王晓东;贺增良;刘团江;;全椎弓根螺钉系统矫正特发性脊柱侧凸[A];第16届全国脊柱&四肢矫形外科(骨科)康复学术研讨会暨学习班论文汇编[C];2007年
2 张磊;刘祖德;;支具在特发性脊柱侧凸治疗中的价值[A];全国骨科临床研究新进展研讨会暨学习班论文集[C];2006年
3 马维虎;徐荣明;阮永平;黄雷;孙韶华;应江炜;蒋伟宇;胡勇;;TSRH系统治疗特发性脊柱侧凸[A];浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十一次学术年会暨省级继续教育学习班论文汇编[C];2005年
4 李明;顾苏熙;;早发性脊柱侧凸的治疗新技术[A];第二届泛长江流域骨科新进展研讨会暨上颈椎伤病新理论新技术学习班论文汇编[C];2008年
5 马维虎;孙韶华;徐荣明;阮永平;黄雷;应江炜;蒋伟宇;;全椎弓根螺钉技术治疗特发性脊柱侧凸[A];2008年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2008年
6 陈宗和;陈钢;喻惜华;李建飞;龚飞鹏;李宇旭;;徒手胸椎椎弓根螺钉置入技术在青少年脊柱侧凸患者中的临床应用[A];第三届中西医结合脊柱及相关疾病学术年会论文集[C];2009年
7 徐华梓;;脊柱侧凸的支具治疗[A];浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十二次学术年会、杭州市中医药协会骨伤科专业委员会第一次学术年会暨继续教育学习班论文汇编[C];2006年
8 邓幼文;吕国华;王冰;刘伟东;;椎弓根螺钉技术治疗胸椎脊柱侧凸并发症分析[A];第八届全国脊柱脊髓损伤学术会议论文汇编[C];2007年
9 徐华梓;;脊柱侧凸的自然史和支具治疗[A];浙江省中西医结合学会骨伤科专业委员会第十二次学术年会、杭州市中医药协会骨伤科专业委员会第一次学术年会暨继续教育学习班论文汇编[C];2006年
10 唐占英;钱雪华;吴弢;毕联阳;叶秀兰;施杞;;上海市部分在校小学生脊柱侧凸现状调查分析研究[A];中国康复医学会第五次全国老年康复学术大会上海市康复医学会成立20周年暨老年康复诊疗提高班论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑国权;基于形状记忆合金棒的脊柱侧凸矫形系列研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
2 郑欣;幼猪早发性脊柱侧凸模型的建立及其相关影像学研究[D];南京大学;2012年
3 王迎松;颈脊髓空洞症时骶棘肌失神经支配、脑脊液流动性改变与胸椎侧凸的相关性研究[D];昆明医学院;2011年
4 张之栋;通络舒筋饮治疗脊柱侧凸术后早期的腰背疼痛及术后功能恢复的临床研究[D];南京中医药大学;2010年
5 韦兴;胸椎椎弓根—肋骨复合体的解剖学、生物力学研究及脊柱侧凸矫形策略的有限元分析[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
6 谭荣;后路小切口微创分期技术在脊柱侧凸矫形中的临床应用研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
7 韩世杰;退行性脊柱侧凸间充质干细胞比较蛋白质组学研究[D];北京协和医学院;2011年
8 赵迪;成人退变性脊柱侧凸有限元模型的建立及后路三维矫形生物力学研究[D];中南大学;2010年
9 吴涛;高中枢瘦素水平对脊柱侧凸影响的动物模型研究及Chiari畸形伴脊柱侧凸患者颈枕部影像学和临床治疗研究[D];南京大学;2012年
10 倪春鸿;脊柱侧凸矫形脊髓损伤机理及其诱发电位监测研究[D];第二军医大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 于威;16排螺旋CT多平面重组研究特发性脊柱侧凸患者胸椎椎弓根形态学[D];吉林大学;2004年
2 郝冉;脊柱侧凸患者的肺功能[D];北京协和医学院;2011年
3 汪小冬;便携式脊柱侧凸多点牵引器具的研制及临床应用研究[D];第二军医大学;2011年
4 吴宏擘;针刀疗法对于缓解脊柱侧凸术后疼痛的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2011年
5 唐翔宇;脊柱侧凸患者肩部外观的系列研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2013年
6 王显钢;胸椎椎弓根螺钉内固定术后植入准确性的CT评价[D];吉林大学;2004年
7 苏李威;非交通性颈脊髓空洞伴脊柱侧凸发生机制的实验研究[D];昆明医科大学;2012年
8 苗二春;新型双足鼠脊柱侧凸模型的建立及椎间盘细胞凋亡的表达[D];中国医科大学;2010年
9 王浩飏;交感神经混合型颈椎病应用胸椎关节按压法疗效观察[D];黑龙江中医药大学;2012年
10 姜亦坤;脊柱侧凸胸椎椎弓根形态学分型系统的可信度与可重复性研究[D];吉林大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 健康时报实习记者 侯洁;脊柱侧凸手术越早越好[N];健康时报;2005年
2 马雄君;严重先天性成人脊柱侧凸手术治疗及难点[N];中国中医药报;2004年
3 高国起;山东省立医院 采用新技术治愈低龄儿严重脊柱侧凸[N];中国医药报;2009年
4 余可谊;脊柱侧凸的“协和分型”得到国际认可[N];中国医药报;2009年
5 本报记者 白秩南;脊柱侧凸可取性命手术矫治纠正扭曲[N];保健时报;2005年
6 高国起;治儿童严重脊柱侧凸有新法[N];健康报;2007年
7 李其一;我国的脊柱侧凸分型系统优势明显[N];中国医药报;2009年
8 王继荣;看看孩子的背直不直[N];中国妇女报;2006年
9 谢明霞;如何早期识别脊柱侧凸[N];大众卫生报;2006年
10 高国起;分期后路术治疗严重脊柱侧凸获成功[N];中国医药报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978