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缺血后适应对树鼩血栓性脑缺血TLR4介导的缺血耐受机制的研究

冯蕊  
【摘要】:目的:观察血栓性脑缺血树(鼠句)皮层及海马toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)表达的改变,进一步探讨缺血后适应对皮层及海马髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)、TLR4表达及炎症反应的影响,旨在探讨缺血后适应的脑保护作用是否与调控TLR4表达及抑制脑内炎症反应有关。 方法:光化学法建立局灶性血栓性脑缺血模型,于脑缺血4h后夹闭右颈总动脉5mmin,再打开5min,共计3个循环建立缺血后适应模型。HE染色观察皮层及海马组织学改变,MPO免疫组化染色观察中性粒细胞浸润情况,免疫组化和免疫印记法测定皮层及海马TLR4蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应测定皮层及海马TLR4mRNA表达。 结果:缺血4、24、72h后皮层神经元损伤及皮层炎性细胞浸润进行性加重,24h达高峰,后适应处理后损伤明显减轻,炎性细胞浸润减少。脑缺血后皮层MPO表达增强,后适应后24及72h表达减少(PP0.05)。脑缺血后皮层TLR4蛋白表达逐渐升高(P0.05),24h达高峰;与脑缺血组比较,后适应4、24h皮层TLR4蛋白表达减少(P0.05),但后适应72h皮层TLR4蛋白表达增加(P0.05)。缺血后适应组TLR4蛋白表达随时间延长呈逐渐增长的趋势。皮层TLR4mRNA的表达趋势与蛋白表达基本一致,后适应4、24h皮层TLR4mRNA表达减少(P0.05),而后适应72h皮层TLR4mRNA表达增加(P0.05)。脑缺血4、24、72h海马神经元损伤进行性加重,24h达高峰;后适应处理后24、72h海马神经元损伤显著减轻(P0.05)。脑缺血后海马TLR4蛋白表达明显增强(P0.05)。与脑缺血组比较,后适应4及24h TLR4蛋白表达减少(P0.05),后适应72h TLR4蛋白表达增加(P0.05)。海马TLR4mRNA的表达趋势与海马TLR4蛋白表达基本一致。 结论:脑缺血时皮层及海马TLR4表达明显增强,缺血后适应的脑保护机制可能部分与调控TLR4表达及抑制脑内炎症反应有关。


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