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不同转移潜能的肿瘤细胞中趋化因子差异表达的研究

白冰  
【摘要】:目的 为深入了解乳腺癌转移发生的分子机制,建立符合临床和实验研究需要的具有不同肺转移特性的人乳腺癌细胞系,进而研究肿瘤转移过程中趋化因子的作用及其调控机制,为临床肿瘤的生物免疫治疗寻找新的可能靶点。方法 体内连续筛选法建立具有自发性肺高转移性的人乳腺癌裸鼠模型,获得有不同转移潜能的乳腺癌细胞系MDA-MB-435W、MDA-MB-435F1、MDA-MB-435F2、MDA-MB-435HM。应用染色体分析、流式细胞仪、体外侵袭试验等方法研究435W和435HM细胞系的生物学特性;应用RT-PCR法检测乳腺癌细胞系MDA-MB-435和人肝癌细胞系MHCC97中趋化因子的表达。结果 435W细胞系染色体数目多数为55-62条,435HM为50-52条:435W与435HM细胞周期中S期所占的百分率分别为40.34%和55.46%。体外侵袭实验示:435W穿过人工基底膜的细胞为54±3.5/HP(高倍视野),435HM为117±11/HP(高倍视野)。435HM 4周内的肺转移率为100%,而435W低于40%;RT-PCR:代表不同家族的4种趋化因子基因在各株细胞系中均呈组成性表达,但其表达水平在各株细胞系不尽相同;表达趋势一致的有:CCL5、CXCL8、CX_3CL1和XCL1。结论 1.本试验结果证实了乳腺癌MDA-MB-435细胞系的异质性,各株细胞由于遗传背景相同,从而为研究乳腺癌发生、侵润和转移的机制提供了一个实验模型。2.人乳腺癌细胞系MDA-MB-435和人肝癌细胞系MHCC97均可组成性地表达目前已知的4个家族的趋化因子,其表达水平因癌细胞的组织来源及转移潜能不同而异,提示不同结构特征的趋化因子可能以不同的方式参与癌细胞生长及转移的调节,同时表明趋化因子可能在肿瘤的转移过程中发挥重要的作用。其调控机制有待进一步研究阐明。


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