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SspA对胸心血管外科生物材料细菌生物膜形成影响的研究

林兴  
【摘要】:目的:观察不同浓度金黄色葡萄球菌丝氨酸蛋白酶(Staphylococcal serine protease,SspA)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus Aureus,SA)在心血管生物材料涤纶表面细菌生物膜(Bacterial Biofilm,BF)形成的影响情况。 方法:自金黄色葡萄球菌(Staphylococcus Aureus,SA)表面提取、纯化SspA,再用于影响金黄色葡萄球菌在生物材料涤纶(Dacron)上的细菌粘附和生物膜(Bacterial Biofilm,BF)的形成。90片涤纶片随机分成三组,每组有30个样本。A组:生物材料涤纶片随机各放入SspA达400ng/ml浓度和10~5CFU/ml浓度的金黄色葡萄球菌菌液的无菌瓶。B组:生物材料涤纶片随机各放入SspA达80ng/ml浓度和10~5CFU/ml浓度的金黄色葡萄球菌菌液的无菌瓶。C组:生物材料涤纶片随机各放入只含有10~5CFU/ml浓度的金黄色葡萄球菌菌液的无菌瓶。培育6,16,24,30,48小时后,利用激光共聚焦扫描显微镜(Confocal Laser Microscopy,CLSM)检测每组五个无菌瓶中生物材料涤纶片上细菌生物膜形成的厚度和数量,同时采用扫描电子显微镜(Scanning electron microscopy,SEM)直接观察细菌生物膜的形成情况。 结果: 一、C组系列样本中细菌生物膜的厚度随着时间的推移逐渐增加,培育48h后,生物膜发展成熟。A组系列样本中细菌生物膜的厚度在每个相应的时点明显较B组和C组要薄(P0.05)。B组系列样本中细菌生物膜的厚度在每个相应的时点明显较C组减少(P0.05)。生物膜厚度统计学分析,三组间差异有显著性(P0.05)。 二、细菌生物膜群落数量对照:A组单位面积细菌生物膜群落数量在每个相应


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