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叶酸及其部分代谢相关分子与人类遗传稳定性初探

吴暇玉  
【摘要】:叶酸是人体正常发育的重要微营养物质,其涉及dUMP到dTMP的合成, 同时通过同型半胱氨酸(HC)合成蛋氨酸(Met)、S-腺苷蛋氨酸(SAM)的生 化过程而影响DNA甲基化。因此,叶酸、维生素B_(12)(B_(12))缺乏以及Met/SAM 合成受阻,可引起dUMP积累并掺入DNA,从而导致各种DNA结构损伤;同 时可影响细胞尤其DNA甲基化过程,从而影响基因表达、染色体分离。 本研究以胞质阻断微核分析(CBMN)研究了叶酸对维护乳腺癌患者及其 对照个体淋巴细胞基因组稳定性的作用及差异,并探讨了叶酸代谢途径中的重 要分子Met、B_(12)缺乏对BRCAI突变的乳腺癌患者成淋巴细胞株及正常人成淋 巴细胞株遗传毒性效应。 研究首先从24例乳腺癌患者、30例正常人外周血中分离淋巴细胞,在含 30nM、120nM、240nM 叶酸的RPMI-1640 培养基中(8%透析小牛血清、100U 双抗、2mM谷氨酰胺、pH7.0)培养,第8天以细胞松弛素B(CB)阻断细胞 质分裂,28小时后收获细胞,以CMBN分析叶酸缺乏对人类淋巴细胞产生的遗 传毒性效应:为了证实Met、B_(12)对叶酸代谢和遗传稳定性的影响,试验还以15,50 μM 的Met与75~1200 pM B_(12)组合的12种RPMI-1640 培养基(8%透析小牛血清、 100U 双抗、2mM 谷氨酰胺、pH7.0),培养携带BRCAI,基因突变的乳腺癌患者 成淋巴细胞株GM13705和正常人成淋巴细胞株GM12593,第8天以细胞松弛素 B(CB)阻断细胞质分裂,28小时后收获细胞,以CMBN分析Met、B_(12)对人类 成淋巴细胞株基因组稳定性的影响。 试验结果表明: 1、在本试验浓度范围内,叶酸浓度与乳腺癌患者及其对照个体淋巴细胞遗传损 伤之间存在显著的负相关(r=-0.248~-0.832,p0.0001):叶酸在30nM时,遗传 损伤均显著高于120nM及240nM (p0.001~0.05):而120nM及240nM两测试 组之间未观察到各指标间的统计学差异,当叶酸升至120nM时,遗传损伤降到 最低,提示在本试验条件下,120nM的叶酸是防范人类淋巴细胞遗传损伤的最


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