收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

植物多酚清除DPPH自由基活性的新方法研究及应用

李晓芬  
【摘要】:传统的抗氧化活性研究方法以分光光度法、荧光光度法和化学发光法为主,但传统的分光光度法存在着灵敏度不高、供试样品消耗量大,可靠性差,对于植物活性成分,还存在着光谱干扰等问题。荧光光度法和化学发光法灵敏度高但所用到的仪器昂贵,分析成本较高,目前还难以普及。液相色谱法和电化学方法具有灵敏度高、可靠性高、样品用量少等优点,可避免有色物质干扰,在抗氧化活性研究中已展现出良好的应用前景。本文针对传统抗氧化活性研究方法的不足,以植物多酚为研究对象,研究了植物多酚清除DPPH自由基的光谱、电化学和液相色谱特征,建立植物多酚清除DPPH自由基活性的光谱、液相色谱和电化学新方法,并应用于藏族药诃子抗氧化活性的研究。 主要研究内容和结果如下: (1)植物多酚的HPLC分析和清除DPPH自由基活性成分研究 以AB-8型大孔吸附树脂对诃子多酚进行分离纯化,经提纯后的诃子精多酚进行HPLC分析检测,建立了HPLC法同时测定诃子中四种主要酚酸化合物没食子酸,香草酸,咖啡酸和对香豆酸含量的方法。色谱条件:流动相A:甲醇;流动相B:乙酸/水(1.0%,v/v)为流动相,室温条件下采用梯度洗脱法:0~(-1)0min (5%A),10-25min (10%A),25-26min (50%A),26-35min (80%A),35-35.1min (100%A)。流速:1.00mL·min~(-1)。进样量:20μL;紫外检测器检测波长:280nm。诃子中没食子酸,香草酸,咖啡酸和对香豆酸的含量分别为1.22mg·g~(-1),0.78mg·g~(-1),0.13mg·g~(-1),1.11mg·g~(-1)。 在诃子精多酚中加入DPPH自由基,通过HPLC-DPPH法研究诃子中对DPPH自由基具有清除作用的活性成分。结果显示:诃子中存在12种对DPPH自由基具有清除作用的活性成分,清除活性最强的是没食子酸,其次是咖啡酸,对香豆酸和香草酸等成分对DPPH自由基的清除能力相对较弱。 (2)植物多酚清除DPPH自由基活性的HPLC分析法研究 建立了植物多酚清除DPPH自由基活性的HPLC分析法,色谱条件:流动相A(甲醇)与B(H2O)的比例为50:50,柱温:25℃,流速:1.00mL·min~(-1)。在3d内,每天测定6次,测定峰面积和保留时间的RSD(相对标准偏差)4%。采用建立的方法,对没食子酸,咖啡酸,对香豆酸和香草酸清除DPPH自由基活性进行了研究,测定了四种样品清除DPPH自由基的相关线性方程。 采用高效液相色谱法测定了4种植物多酚的DPPH自由基清除活性,获得了DPPH自由基清除率与植物多酚浓度的线性方程,据此计算出50%清除率的植物多酚浓度(IC50)和方程的斜率进行评估。4种植物多酚的抗氧化活性顺序为没食子酸咖啡酸香草酸对香豆酸。 (3)植物多酚与DPPH自由基反应的光谱特征及微量光谱滴定法研究 采用分光光度计法研究了没食子酸,香草酸,咖啡酸和对香豆酸4种植物多酚与DPPH自由基反应的光谱特征,DPPH稳定时间为1h,达到最大清除的时间:没食子酸(10min)﹤咖啡酸(20min)﹤香草酸(30min)﹤对香豆酸(35min)。没食子酸和咖啡酸能有效、快速的清除DPPH自由基。研究发现,诃子多酚提取物具有良好的清除DPPH自由基活性,没食子酸和咖啡酸是其清除DPPH自由基的主要活性物质。 在对植物多酚与DPPH自由基反应的光谱研究基础上,发展了植物多酚清除DPPH自由基的微量光谱滴定法。测定了没食子酸、咖啡酸、香草酸和对香豆酸对不同浓度DPPH清除作用的光谱滴定曲线,获得了4种植物多酚与DPPH反应的化学计量比分别为:1:3,1:2,1:0.0015,1:0.0004。误差分析表明,光谱滴定法的误差与DPPH浓度及植物多酚清除自由基的能力有关,植物多酚清除能力越强,则RSD越小。对于没食子酸和咖啡酸,高浓度(0.007mg·mL~(-1))和中浓度(0.004mg·mL~(-1))RSD值小于2%。但低浓度(0.002mg·mL~(-1))时,4种酚酸的测量误差都明显增加。 (4)植物多酚电化学氧化机理与清除DPPH自由基的电化学滴定法研究 在对没食子酸(GA)和咖啡酸(CA)的电化学氧化机理研究的基础上提出一种新型微量电化学滴定分析方法,使用差分脉冲伏安法(DPV)电化学分析方法,测定了电化学滴定曲线,根据电化学滴定曲线计算没食子酸,咖啡酸与DPPH反应的化学计量关系。实验结果表明,没食子酸和咖啡酸与DPPH自由基反应的化学计量关系分别为1:2和1:3。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 史青;淡紫女贞叶中的抗氧化物质[J];国外医学.中医中药分册;2002年03期
2 金莹;孙爱东;;苹果多酚清除DPPH自由基活性的研究[J];中国酿造;2006年05期
3 钟远声;李熙灿;谢学明;黄春花;;荜茇清除DPPH自由基能力的研究[J];辽宁中医药大学学报;2007年01期
4 刘胜兰;曾艳波;韩壮;梅文莉;戴好富;;海南粗榧中的木脂素及其抗氧化活性[J];河南大学学报(医学版);2008年03期
5 孙涛;付雪艳;张蓓;董琳;;DPPH法测定沙棘籽原花青素清除自由基的能力[J];宁夏医科大学学报;2009年01期
6 王丽;张丽;康文艺;许启泰;;芦丁清除DPPH自由基分光光度法与微量法抗氧化活性研究[J];中成药;2009年11期
7 赵永昕;窦君;信学雷;阿吉艾克拜尔·艾萨;;DPPH法评价草棉花不同提取物体外抗氧化作用[J];中成药;2011年08期
8 吴根福,杨志坚;炭角菌深层发酵制品的抗氧化特性研究[J];浙江大学学报(理学版);2002年02期
9 娄红祥,赵艳,任冬梅,范培红,季梅;蛇葡萄根中茋类化合物的鉴定及其抗氧化作用(英文)[J];中国药物化学杂志;2004年04期
10 刘红;胡咸俊;王维;汤威峰;王琳;苏秀丹;赵丹薇;钟琼芯;;热带植物花卉的抗氧化性研究[J];海南师范学院学报(自然科学版);2007年04期
11 陈鹏;云宇;张小超;王殿华;雷伟亚;沈志强;;灯盏乙素对DPPH所致血管内皮依赖性舒张功能障碍的影响[J];昆明医学院学报;2007年06期
12 霍超;宋曙辉;徐桂花;冯丽;杨建兴;;朝鲜蓟叶片多酚化合物提取及体外抗氧化研究[J];食品科技;2008年04期
13 李安平;谢碧霞;陶俊奎;王俊;;竹笋抗氧化活性比较研究[J];营养学报;2008年03期
14 郭少英;程发峰;钟相根;鲁艺;宋文婷;王庆国;;黄芩苷的体外抗氧化研究[J];时珍国医国药;2011年01期
15 谢学明;钟远声;李熙灿;黄海波;刘晓玲;麦惠环;;22种华南地产药材的抗氧化活性研究[J];中药药理与临床;2006年01期
16 丁苏;施用晖;王海松;乐国伟;陈皇女;袁欣;鲍洋;;不同聚合度低聚木糖体外清除自由基活性研究[J];食品与发酵工业;2008年04期
17 李翠芹;王喆之;张丽燕;;生、炒王不留行抗氧化活性的比较研究[J];中药材;2008年06期
18 陈翠;杨丽云;吕丽芬;赵菊;徐中志;;10种药用植物提取物抗氧化活性的研究[J];云南中医中药杂志;2008年11期
19 任玮;金振涛;陈亮;蔡木易;易维学;;食源性低聚肽体外抗氧化活性研究[J];食品与发酵工业;2008年12期
20 赵学超;陆建安;王淼;杨严俊;;鸡蛋黄中叶黄素清除DPPH自由基活性研究[J];食品工业科技;2009年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 夏小明;刘小强;刘绣华;张杰;;木犀草素清除DPPH自由基机理研究[A];中国化学会第28届学术年会第9分会场摘要集[C];2012年
2 刘婷婷;韩春姬;俞星;许妍姬;;发酵轮叶党参提取物清除DPPH自由基作用研究[A];中国活性氧生物学效应学术会议论文集(第一册)[C];2011年
3 施树云;张宇平;黄可龙;;基于HPLC-DAD-DPPH-MS/MS的管花蒲公英中抗氧化活性成分在线筛选和鉴定[A];中国化学会第八届天然有机化学学术研讨会论文集[C];2010年
4 熊文说;孙洋;颜剑波;王鸿;刘化章;应国清;;水溶性壳聚糖的制备及其抗氧化活性的研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年
5 熊文说;孙洋;张杨;颜剑波;王鸿;刘化章;应国清;;水溶性壳聚糖的制备及其抗氧化活性的研究[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
6 张作法;时连根;;桑枝中多酚类化合物以及其抗氧化性的研究[A];“蚕业生物技术与家蚕病害控制”高级研讨班、“家蚕生理、病理和生物技术”学术研讨会论文选集[C];2006年
7 康文艺;刘瑜新;王俊霞;李园园;;杠板归抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究[A];中国成人医药教育论坛[2010(3)][C];2010年
8 贾贵东;杨建雄;;芦丁与绿原酸协同抗氧化活性的研究[A];药用植物化学与中药有效成分分析研讨会论文集(上)[C];2008年
9 屠幼英;陈晓敏;杨子银;徐懿;;茶树花抗氧化活性研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
10 单斌;张智武;孙丽萍;朱小丽;;不同蜂胶制品的黄酮类组成分析和抗氧化作用研究——Ⅰ.蜂胶制品的黄酮类组成分和清除DPPH的作用[A];中国养蜂学会蜜蜂产品、蜜蜂保护、蜜源与授粉专业委员会第七次学术研讨会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 朱娜;柳叶鬼针草黄酮类成分与生物活性研究[D];吉林大学;2009年
2 赵丰;含羟基、巯基及氨基化合物抗氧化性能的研究[D];吉林大学;2011年
3 王晓炜;田基黄抗缺氧活性成分的研究[D];沈阳药科大学;2009年
4 尚亚靖;酚类抗氧化剂的结构修饰及其细节性机制研究[D];兰州大学;2010年
5 张友维;枯草芽孢杆菌发酵花生粕制备抗氧化肽的研究[D];江南大学;2012年
6 李岩峰;含羟基化合物抗氧化性能与构效关系的研究[D];吉林大学;2012年
7 田蔚;米渣霉菌发酵产物分离鉴定及抗氧化活性研究[D];湖南农业大学;2012年
8 王瑞;植物多酚对皮革中Cr(Ⅵ)的防治机理及防治作用研究[D];陕西科技大学;2011年
9 李国祥;含-OH、-SH、-NH及C=C化合物抗氧化与促氧化性能的研究[D];吉林大学;2010年
10 刘华伟;栗树单宁的抗氧化能力及其对肉兔生产性能的影响研究[D];中国农业科学院;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李晓芬;植物多酚清除DPPH自由基活性的新方法研究及应用[D];云南民族大学;2012年
2 韩立强;肌肽清除自由基及抗氧化性研究[D];河南农业大学;2004年
3 刘栋;甘薯功能性成份研究[D];扬州大学;2004年
4 杨晶;甜菜的抗氧化研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
5 崔琳;灯盏乙素对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用及其机制探讨[D];昆明医学院;2007年
6 刘锐;茜草中生物活性成分的逆流色谱分离研究[D];浙江大学;2008年
7 隋小宇;迷迭香天然功能成分的提取、精制工艺及活性测定的研究[D];东北林业大学;2009年
8 王磊;天津地区14种果树叶提取物的研究[D];天津师范大学;2008年
9 姚育翠;玫瑰花中原花青素的分离分析及抗氧化活性研究[D];浙江大学;2008年
10 蒋利利;羊蹄和枇杷叶水溶性成分的研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 中国化学制药工业协会;植物多酚 有待开发的医药“金矿”(下)[N];医药经济报;2003年
2 中国化学制药工业协会;植物多酚——有待开发的医药“金矿”(上)[N];医药经济报;2003年
3 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所研究员 陈君石;保护你的DNA[N];健康报;2008年
4 实习生 马俊虎樊乐;抗氧化食物怎样为健康加码?[N];科技日报;2008年
5 魏国华 许新德 邵斌 刘钟栋;乌饭树叶提取物在食品中的应用[N];中国食品质量报;2009年
6 张红真;如何延缓雌性激素减退[N];家庭医生报;2006年
7 ;蔬菜水果减皱纹[N];卫生与生活报;2006年
8 谭西顺;抗衰老的武器[N];大众卫生报;2005年
9 ;人体的除锈剂——原花青素[N];保健时报;2005年
10 ;古蔺肝苏的抗氧化作用[N];健康报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978