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牛血清白蛋白脂质体的研究

刘娟  
【摘要】:本研究以牛血清白蛋白(BSA)作为药物模型,研究BSA脂质体的制备工艺,并对其冻干过程的工艺条件进行优化,旨在提高蛋白的稳定性、保持其活性。针对上述问题展开了以下几个方面的研究工作: 首先,本课题建立了BSA脂质体包封率的测定方法,采用高速离心法分离脂质体和游离蛋白,考马斯亮蓝法测定包封率,并对其进行了方法学考察。 其次,选择固体大豆卵磷脂和胆固醇为原料,无水乙醚为有机溶剂,pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液为水合介质,确定采用逆向蒸发法制备BSA脂质体的工艺流程。添加不同的保护剂对BSA脂质体进行冷冻干燥,考察了冻干产品的外观、再分散性、包封率、粒径等指标,确定了海藻糖为最佳的保护剂,且当海藻糖/磷脂(m/m)为6:1时,脂质体包封率可达67.2%。稳定性实验结果表明,BSA脂质体在4℃避光放置90天后,外观、粒径、包封率和稳定性等指标基本保持稳定。 最后,采用响应面法优化BSA冻干脂质体的处方工艺。运用星点设计考察胆固醇/卵磷脂(m/m)、BSA浓度(mg/mL)和海藻糖浓度(mg/mL)三因素对BSA冻干脂质体包封率和载药量的影响及其交互作用。根据实验数据建立二次多项式回归模型,并对其进行响应面分析。BSA冻干脂质体最佳工艺条件为:胆固醇/卵磷脂(m/m)为0.25、BSA浓度为3.40mg/mL、海藻糖浓度为33.00mg/mL。该条件下BSA冻干脂质体包封率为63.10%、载药量为26.91%,平均粒径为169.4nm。


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