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达乌尔黄鼠冬眠阵及冬眠期骨骼肌胞浆钙调节的研究

孙小勇  
【摘要】:研究目的: 1.探索实验室条件下达乌尔黄鼠(Spermophilus douricus)饲养与繁殖的方法及冬眠阵的发生规律。 2.比较废用状态下达乌尔黄鼠和大鼠骨骼肌胞浆钙调节功能及肌质网钙调节功能的异同。 3.研究川芎嗪对吊尾大鼠骨髂肌胞浆钙调节功能及肌质网钙调节功能的影响。 研究方法: 1.参照动物野外冬眠洞穴的主要生态环境参数,建立人工冬眠屋,采用传统锯末技术记录冬眠阵; 2.定磷法测定骨骼肌Na+,K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶总活力及骨骼肌肌质网Ca2+-ATP酶活力; 3.蛋白免疫印迹法测定骨骼肌肌质网Ca2+-ATP酶亚型(SERCA2)表达。 研究结果: 1.实验室饲养黄鼠的存活率为78.9%,繁殖成活率为66.7%,动物肥满度以秋季最高,为4.04g/cm3,分别比春季、夏季、冬季高34.15%(P0.01)、50.88%(P0.01)和21.46%(P0.01)。 2.冬眠屋黄鼠的冬眠期平均为93.95天,冬眠阵睡眠时长平均7.44天,阵间激醒时长平均1.36天,睡眠天数占整个冬眠期的89.9%,整个冬眠期,每只动物的冬眠阵数目平均7.55个。 3.与正常大鼠相比,尾部悬吊+溶媒灌胃组(TS-W)比目鱼肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力分别升高了46.99%(P0.01)和38.57%(P0.01),尾部悬吊+川芎嗪灌胃组(TS-TMP)比目鱼肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力分别升高了25.36%(P0.05)和21.20%(P0.05):TS-TMP组相比TS-W组,比目鱼肌Na+,K+-ATP酶活力下降了14.71%(P0.05),Ca2+-ATP酶活力则无显著影响(P0.05);大鼠趾长伸肌各组间Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力无显著差异(P0.05)。 4.尾部悬吊对黄鼠比目鱼肌、趾长伸肌Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶总活力均无显著影响(P0.05);冬眠前、中、后各组间比目鱼肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力无显著差异(P0.05),阵间激醒组Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力最低,激醒后再入眠组这两种酶活力最高,与各组间均存在显著差异(P0.05);冬眠前、中、阵间激醒及激醒后再入眠各组间趾长伸肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力无显著差异(P0.05),出眠组黄鼠趾长伸肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力最高,与各组间存在显著差异(P0.05)。 5.TS-W组及TS-TMP组大鼠比目鱼肌肌质网Ca2+-ATP酶活力分别较正常组升高了30.55%和25.78%,均存在显著差异(P0.05);TS-W组及TS-TMP组大鼠比目鱼肌SERCA2(肌质网Ca2+-ATP酶氧化型亚型)相对表达量分别较正常组升高了21.79%(P0.01)和20.90%(P0.05),均存在显著差异;TS-W组与TS-TMP组之间Ca2+-ATP酶活力及SERCA2表达均无显著差异(P0.05);各组大鼠趾长伸肌肌质网Ca2+-ATP酶活力及SERCA2表达均无显著性差异(P0.05)。 6.尾部悬吊对黄鼠比目鱼肌、趾长伸肌肌质网Ca2+-ATP酶活力均无无显著影响(P0.05);与秋季组相比,秋季吊尾组比目鱼肌SERCA2表达量增大64.94%(P0.01),趾长伸肌SERCA2表达无显著变化。冬眠期各组间比目鱼肌肌质网Ca2+-ATP酶活力及SERCA2表达均增大,存在极显著差异(P0.01);趾长伸肌肌质网Ca2+-ATP酶活力无显著性差异(P0.05),阵间激醒及激醒后再入眠组趾长伸肌SERCA2表达量增多,与各组间存在显著差异(P0.05)。 研究结论: 1.野生黄鼠可在人工饲养条件下实现繁殖,并可在人工冬眼屋成功冬眠; 2.吊尾大鼠比目鱼肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力显著上升,川芎嗪能在一定程度上抑制比目鱼肌Na+,K+-ATP酶活力升高;尾部悬吊对大鼠趾长伸肌、黄鼠比目鱼肌和趾长伸肌均无显著影响;冬眠期黄鼠胞浆钙调节中酶活下降,与吊尾大鼠相反; 3.吊尾大鼠比目鱼肌肌质网Ca2+-ATP酶活力及SERCA2表达量显著升高,趾长伸肌则无显著变化;尾部悬吊使黄鼠比目鱼肌SERCA2表达增加,而肌质网Ca2+-ATP酶活力则不变;冬眠期黄鼠比目鱼肌肌质网Ca2+-ATP酶活力及SERCA2表达量增大,对趾长伸肌则无显著影响。


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