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戊二醛聚合猪血红蛋白对化疗贫血小鼠治疗作用的初步研究

马慧娅  
【摘要】:贫血影响了全球约1/3人口的健康,是许多疾病的信号,严重影响人们的生活质量。贫血是恶性肿瘤患者常见的并发症之一,其常用治疗方式为化疗,研究表明化疗药物有骨髓抑制的毒副作用,骨髓是造血和免疫细胞的主要来源,其骨髓抑制性会导致贫血发生。临床现用红细胞生成刺激剂(Erythropoiesis-stimulating agents,ESA)治疗贫血,但研究表明ESA会增加癌症患者心脑血管疾病的发生率和死亡率等,其安全性有待评估。因此,新型的更具安全性的抗贫血药物有待研究。戊二醛聚合猪血红蛋白(Polymerized porcine hemoglobin,pPolyHb)是一种新型的具有携氧和释氧功能的聚合血红蛋白,其pPolyHb作为一种HBOCs的蛋白类药物研究过程中建立的都为失血性贫血动物模型,且pPolyHb用量较大。在以往对于pPolyHb安全性和有效性研究过程中发现pPolyHb有着提高失血性贫血动物体内红细胞含量的作用,故本文中我们首次初步探究在化疗贫血动物模型中运用pPolyHb,是否可以影响化疗贫血动物自身造血相关生理状态或功能,同时调节化疗贫血动物体内Hb水平。动物模型建立方面,首先选用化疗药物环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)与卡铂(Carboplatin,CBP)探究化疗贫血小鼠模型建立方案,对比CTX单独给药组和CTX+CBP联合用药组小鼠贫血状态,通过检测小鼠外周血Hb浓度、RBC含量、体内造血相关细胞因子(EPO、GM-CSF、IL-6、IL-10、HIF-1α)含量确立具体化疗贫血方法,本文采用具体造模方案:第1-3天腹腔注射CTX 100 mg/kg,第四天腹腔注射CTX150 mg/kg,第5天腹腔注射CTX 200 mg/kg。pPolyHb分别在化疗结束后干预和化疗进行时干预贫血小鼠的抗贫血治疗,用以明确pPolyHb对化疗贫血小鼠的治疗作用。化疗结束后干预法:造模成功后小鼠随机分组:1)空白对照组;2)CTX自然恢复组;3)pPolyHb 4个剂量组(0.3、1、10、50 mg/kg);4)人促红细胞生成素(150、1000 U/kg)为阳性对照组;5)白蛋白组(1、10、50 mg/kg);6)猪血红蛋白组(1、10、50 mg/kg),在停止注射化疗药物后连续给药3d,检测各组小鼠外周血RBC,Hb浓度,用ELISA检测各组小鼠肾脏组织中EPO、骨髓细胞悬液中GM-CSF、血清中IL-6、IL-10、HIF-1α浓度。结果显示,pPolyHb组中1 mg/kg和10 mg/kg剂量可以显著提高化疗贫血模型小鼠外周血中RBC数、Hb浓度(P0.05),同时可提高化疗贫血小鼠促进造血生长因子EPO、GM-CSF的浓度(P0.05),减少造血抑制因子(IL-6、IL-10)的含量(P0.05),平衡体内HIF-1α含量,改善体内造血微环境。化疗进行时干预法:小鼠注射化疗药物阶段用pPolyHb干预贫血治疗,第1-10d小鼠腹腔注射CTX,化疗第5-10d注射pPolyHb(1、10 mg/kg)和ESA(150 U/kg),通过检测Hb、EPO、GM-CSF、IL-6的浓度,实验数据表明1 mg/kg pPolyHb组小鼠可以显著提高贫血小鼠外周血Hb浓度。综合两部分实验结果表明pPolyHb对化疗药物引起的骨髓抑制贫血小鼠有着较好的治疗作用。


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