收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

基于受体色谱固定相一步制备策略的宣白承气汤活性成分筛选研究

曾凯竹  
【摘要】:中药是人类防治疾病的主要用药形式之一,也是现代高效创新药物研发的主要源泉。欲以中药为源泉进行创新药物研发,如何发现其活性成分是主要瓶颈问题,迫切需要发展新原理、建立新方法、形成新技术,以实现中药复杂体系活性成分快速解析。围绕该问题,已有研究先后建立了溶液中酶和细胞模型等一系列中药活性成分筛选技术。然而从筛选特异性及准确度等方面分析,上述方法仍存在难以解决的问题。因此,中药活性成分快速筛选方法研究依然是该领域的热点前沿问题之一。作者所在实验室在前期的研究工作中,融合体内药物与受体识别的特异性和色谱技术的高分离能力,提出并建立了以固定化G蛋白偶联受体为核心的受体色谱方法,证明其可用于中药活性成分快速筛选。然而,由于固定化受体的制备往往需要对蛋白进行复杂的分离纯化,导致其活性损失,从而影响受体色谱技术活性成分筛选准确率。针对该问题,本论文以创建固定化β_2-肾上腺素受体(β_2-AR)等受体蛋白一步制备技术为突破口,开展宣白承气汤活性成分筛选研究,以期为中药复杂体系活性成分高效筛选提供技术借鉴。本论文共分四章,论文主要结果如下:1、受卤代烷烃脱卤素酶与其底物间特异性共价反应启发,以β_2-AR等三种受体为例,建立了受体色谱固定相一步制备新方法。将该酶融合至受体碳末端,大肠杆菌重组表达获得融合受体,6-氯己酸修饰硅胶微球,通过混合重组受体与修饰微球,利用酶与微球表面修饰基团间的特异性生物正交反应,将受体共价固定至硅胶微球表面。X射线光电子能谱对其进行元素分析、扫描电子显微镜等技术对其形貌进行表征,激光共聚焦显微镜对配体识别活性进行表征,液相色谱-质谱联用技术对其脂质微环境进行表征。该方法由于避免了复杂的蛋白分离纯化过程,能通过共价键在表面形成单层均质的受体蛋白涂层,具有固定化受体取向统一、稳定性好和活性强的特点,能为高活性受体色谱固定相的快速制备提供方法借鉴。2、基于固定化β_2-AR色谱固定相,采用三种方法研究了该受体与沙丁胺醇等3种工具药的相互作用。分子对接法对其进行佐证。结果表明,三种配体与固定化β_2-AR均存在一类结合位点,亲和力大小排序分别为卡拉洛尔异丙肾上腺素沙丁胺醇,该结果与文献中放射性配体法测定结果一致。分子对接研究结果表明,氢键作用力是药物-受体相互作用的推动力。说明本论文建立的固定化β_2-AR色谱模型可用于受体与配体的相互作用研究,为β_2-AR特异性活性成分筛选提供了色谱新方法。3、采用固定化β_2-AR色谱方法对中药复方宣白承气汤进行了筛选,液质联用法对保留成分进行结构鉴定,考察其在肺、肠组织中的分布特征。结果表明:在治肺组和治肠组原药中存在与β_2-AR特异性结合的靶向成分,分别为苦杏仁苷、儿茶素、大黄素、大黄素葡萄糖苷和大黄酚葡萄糖苷。给药后3小时,肺、肠组织中仍然可以检测到大黄素和大黄素葡萄糖,提示宣白承气汤肺肠合治抗哮喘作用可能与β_2-AR靶向成分有关,大黄素和大黄素葡萄糖苷可能为合治的活性成分,为明确宣白承气汤肺肠合治活性成分提供了一定的依据,有望为其它中药治法治则物质基础研究提供方法学借鉴。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前15条
1 史雪岩,傅若农;金属络合物作气相色谱固定相的进展[J];分析化学;2000年01期
2 刘家玮;刘湘唯;Habib Ur Rehman;赵晓霞;白泉;;金属有机框架色谱固定相的研究进展[J];分析测试技术与仪器;2021年02期
3 李国兴;施青红;朱岩;;离子色谱固定相最新进展[J];化学分析计量;2005年06期
4 孙元社;瞿其曙;于淑新;李霜霜;唐涛;李彤;;一种新型核壳型色谱固定相在高效液相色谱中的评价及应用[J];色谱;2016年12期
5 吕凌岳;;液相色谱固定相的相关研究[J];科技创新导报;2018年11期
6 张旭冬;胡志雄;张维农;贺军波;齐玉堂;;巯基键合银离子色谱固定相的制备及其在油脂分析中的应用[J];食品安全质量检测学报;2016年04期
7 蔡龙飞;;凹凸棒石粘土的分离性能及其在离子色谱固定相研究中的应用前景[J];江西化工;2011年02期
8 ;几种液体色谱固定相的研制和测试[J];分析仪器;1976年04期
9 傅若农;;近几年国内外气相色谱固定相的进展[J];分析试验室;2013年05期
10 周岩;字敏;韩熠;许志刚;任朝兴;严志宏;袁黎明;;新型离子液体气相色谱固定相研究[J];化学试剂;2006年01期
11 李新华,赵岷,寇登民,李冬梅;十二烷基苯磺酸钙色谱固定相对有机酸的分析[J];现代仪器;2004年03期
12 吴缨;气相色谱固定相的近期发展[J];合肥联合大学学报;2001年03期
13 邹公伟,胡冠九,郑琦;纤维素三苯甲酯的合成及其作为气相色谱固定相的性能研究[J];分析化学;1994年04期
14 谭凯锋;刘波涛;蔡淑红;刘保锋;;离子液体在气相色谱固定相中的研究进展[J];科技传播;2016年05期
15 加晓丹;柯从玉;孙萱;耿信笃;;关于混合模式色谱固定相对蛋白保留特征的研究[J];化学学报;2012年15期
中国重要会议论文全文数据库 前20条
1 王路军;任秀君;周迪;骆秋蓉;夏之宁;;混合模式色谱固定相的制备及其在复杂体系中的应用[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第一卷)[C];2019年
2 王振忠;唐可仁;雷乐乐;李深慧;樊靓;;新型卟啉类气相色谱固定相研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第三卷)[C];2019年
3 于辉;杜娟;刘后梅;;多类型氨基修饰硅胶色谱固定相的制备及其亲水色谱性能评价[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第三卷)[C];2019年
4 钱海龙;杨成雄;严秀平;;功能共价有机骨架的制备及色谱应用[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第一卷)[C];2019年
5 邱洪灯;;硅胶表面改性色谱固定相[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第一卷)[C];2019年
6 乔晓强;;氨基酸离子液体功能化新材料制备及色谱分离性能研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第一卷)[C];2019年
7 齐美玲;;新型蝶烯类气相色谱固定相的研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第一卷)[C];2019年
8 王媛;付蒙蒙;韩爱坤;赵文杰;;葡萄糖基微孔有机聚合物核壳型色谱固定相的制备[A];河南省化学会2020年学术年会论文摘要集[C];2020年
9 付蒙蒙;王媛;韩爱坤;娄旭华;赵文杰;;基于十八烯和烯丙基甘氨酸的反相/亲水混合模式色谱固定相[A];河南省化学会2020年学术年会论文摘要集[C];2020年
10 韩阳洋;刘明琛;李新庭;梁鹏;闫宏远;乔晓强;;POSS修饰二氧化硅核壳型色谱固定相制备及分离性能研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第二卷)[C];2019年
11 任秀君;胡程霞;骆秋蓉;夏之宁;王路军;;聚乙烯亚胺嵌入苯基型混合模式液相色谱固定相研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第二卷)[C];2019年
12 熊雪;齐美玲;;腺嘌呤功能化聚丙二醇气相色谱固定相的研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第二卷)[C];2019年
13 和永瑞;齐美玲;;三蝶烯-聚乙二醇类色谱固定相的研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第二卷)[C];2019年
14 袁茜;齐美玲;;离子液体衍生化三蝶烯气相色谱固定相的研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第二卷)[C];2019年
15 史田田;齐美玲;;三蝶烯功能化新型色谱固定相的研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第二卷)[C];2019年
16 王振忠;唐可仁;雷乐乐;李深慧;樊靓;;新型卟啉类气相色谱固定相研究[A];中国化学会第22届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第二卷)[C];2019年
17 余琼卫;郑凤;方凯敏;冯钰锜;;纳米氧化锆沉积硅胶色谱固定相的制备及亲水作用色谱行为[A];2019年全国无机硅化物行业协会年会暨会员大会论文集[C];2019年
18 熊偲凤;张念喆;王骊丽;;以羧基甜菜碱为配基的混合模式色谱固定相制备、表征及性能评价[A];中国化学会第十三届全国分析化学年会论文集(二)[C];2018年
19 邱洪灯;蔡天培;陈佳;张海娟;李湛;;新型亲水色谱固定相研究进展[A];中国化学会第十三届全国分析化学年会论文集(二)[C];2018年
20 ;色谱固定相极性测试方法的改进[A];天津市色谱研究会第一届学术报告会论文、报告(摘要)汇集[C];1980年
中国博士学位论文全文数据库 前20条
1 曾凯竹;基于受体色谱固定相一步制备策略的宣白承气汤活性成分筛选研究[D];西北大学;2020年
2 杨帆;聚合物基质IEC/HIC双功能色谱分离介质的制备及应用[D];西北大学;2015年
3 严志明;几种金属有机骨架化合物在分离分析中的应用[D];福州大学;2015年
4 吕庆;环三藜芦烃及三聚茚类新型气相色谱固定相的分离性能及应用研究[D];北京理工大学;2016年
5 李媛媛;硅基亲水作用液相色谱固定相的制备及应用研究[D];兰州大学;2012年
6 戴小军;新型亲水作用色谱固定相的制备及色谱性能研究[D];西北大学;2011年
7 王轻;新型液相色谱固定相的制备、表征及应用研究[D];华中科技大学;2016年
8 夏岩石;大麦生物活性成分的遗传分析及应用研究[D];华南理工大学;2012年
9 彭章晓;“清热、解毒、散结”类中药抗乳腺癌活性成分的筛选及其药理机制研究[D];上海交通大学;2014年
10 张灏;海参及其活性成分改善小鼠高尿酸血症的作用及机制[D];中国海洋大学;2014年
11 张宇平;天然产物活性成分快速分离分析研究[D];中南大学;2012年
12 钟莺莺;新型聚合物碳纳米管复合色谱固定相的研究及应用[D];浙江大学;2010年
13 陈颖;远志活性成分的吸收和代谢研究[D];中国协和医科大学;2009年
14 姚礼峰;路易斯碱改性氧化锆色谱固定相的制备与性能研究[D];武汉大学;2004年
15 黄兰芳;联用色谱在中药和生物样本中活性成分的分析方法及其应用研究[D];中南大学;2004年
16 彭密军;杜仲中高纯活性成分的分离制备新工艺研究[D];中南大学;2004年
17 乌斯嘎勒;蛋白复合物/组装粒子对活性成分的保护及其相互作用研究[D];江南大学;2020年
18 李晶;整体型色谱固定相在离子色谱中的研究与应用[D];浙江大学;2009年
19 李渊;双孔介质在高速色谱分离中的应用[D];天津大学;2005年
20 郑健;留兰香活性成分的研究[D];沈阳药科大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前20条
1 毛晓静;几种纤维素类手性固定相及聚合物基质亲水色谱固定相的合成与色谱评价[D];华中科技大学;2019年
2 Ruisha Li;环境友好型无溶剂法制备键合硅胶色谱固定相[D];天津大学;2018年
3 韩阳洋;POSS修饰二氧化硅核壳型色谱固定相制备及分离性能[D];河北大学;2019年
4 赵双丽;混合模式色谱固定相的制备及其在毛细管液相色谱中的性能评价[D];华东师范大学;2019年
5 李雪云;金属有机骨架核—壳色谱固定相制备及分离应用[D];河北大学;2018年
6 王胜玉;咪唑嵌合半胱氨酸反相/亲水混合模式色谱固定相制备及性能研究[D];河北大学;2018年
7 王建山;以两性离子为配基的混合模式色谱固定相的制备及其对蛋白质的分离[D];西北大学;2016年
8 杨晨曦;新型咪唑类亲水作用色谱固定相的制备及其色谱性能评价[D];青岛科技大学;2018年
9 代倩;金属—有机框架核壳色谱材料制备及分离性能研究[D];河北大学;2017年
10 徐基伟;反相强阳离子交换混合色谱固定相的制备、评价及应用[D];南京理工大学;2016年
11 张帆;辛基-咪唑/季铵双配体键合硅胶混合色谱固定相及其在复方药物中的分析应用[D];天津大学;2019年
12 张双红;不含芳烃的混合模式色谱固定相的制备、表征及其在药物分析中的应用[D];天津大学;2019年
13 于程程;共轭微孔聚合物包覆二氧化硅色谱固定相制备及分离性能研究[D];河北大学;2021年
14 魏远隆;新型离子交换色谱固定相的制备及应用[D];南京理工大学;2004年
15 楚建祥;新型柱[5]、柱[6]芳烃色谱固定相的制备及其色谱性能研究[D];郑州大学;2015年
16 常亮亮;聚合离子液体—液晶混合物作为气相色谱固定相的制备及性能研究[D];齐齐哈尔大学;2014年
17 唐晓辉;用于蛋白质分离的温敏色谱固定相的合成、表征及应用[D];西北大学;2011年
18 祖凤娇;聚乙烯亚胺内嵌型混合模式液相色谱固定相研究[D];西南医科大学;2020年
19 王一欣;以离子液体为配基的混合模式色谱固定相制备及其对蛋白质的分离纯化[D];西北大学;2015年
20 周珊珊;一种反相/弱阳离子交换混合模式色谱固定相制备及在蛋白质组学研究中的应用[D];广西医科大学;2016年
中国重要报纸全文数据库 前12条
1 记者 田学科;滴眼液中活性成分可用于治疗血癌[N];科技日报;2018年
2 记者 张梦然;“疫苗解剖”法可鉴别药物未知活性成分[N];科技日报;2017年
3 孙瑶;赢创南宁新药物活性成分厂建成[N];中国化工报;2010年
4 记者 杨英春 实习生 庞文生;可食植物及活性成分国际研讨会召开[N];新疆日报(汉);2008年
5 ;什么是活性成分、限复方制剂活性成分及复方制剂?[N];中国医药报;2000年
6 李晨;科研人员揭示新疆红花蜂蜜特殊生物活性成分[N];中国科学报;2021年
7 本报驻巴西特派记者 李晓骁 宇扬;中国再向巴西运送疫苗活性成分[N];环球时报;2021年
8 记者 秦秋;丹参活性成分或能人工合成[N];健康报;2012年
9 记者 白毅;中药复杂体系活性成分系统分析方法构建成功[N];中国医药报;2013年
10 记者 杨宏辉;朗盛活性成分前体产能扩张[N];中国化工报;2009年
11 记者 方云静 实习生 薛小明;可食植物资源及活性成分国际研讨会召开[N];新疆日报(汉);2010年
12 本报记者 王华锋;建立药物非活性成分数据库十分必要[N];中国医药报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978