紫外线对细胞DNA损伤与损伤中钙离子信号变化的荧光检测分析

【摘要】：UV是对生物体造成损伤的最基本的环境因子之一。检测小鼠肝细胞经UVA、UVB、UVC三种不同波段的紫外线处理后的细胞DNA损伤程度与损伤过程中的[Ca~(2+)]_i,旨在确定生物体损伤程度与UV波长和照射剂量之间的关系,对于研究UV损伤机理具有重要意义。 本文论述了生物细胞的DNA损伤的类型和成因,介绍了检测损伤的各种方法,探讨了细胞DNA损伤过程中的Ca~(2+)信号的作用机理,并进行了大量的实验论证。实验中采用的是单细胞凝胶电泳法,分别检测了小鼠肝细胞经UVA、UVB、UVC三种不同波段的紫外线处理后的细胞DNA损伤程度、不同剂量的UV对细胞造成的DNA损伤程度,用比率荧光检测法测定了在UV损伤过程中小鼠肝细胞[Ca~(2+)]_i。其结果表明: ① UV能否对细胞DNA造成损伤主要取决于UV的波长(或频率); ② UV的照射能量与其造成的细胞DNA损伤程度呈正相关; ③ 对细胞造成DNA损伤的UV具有低能量阈值和高能量平台; ④ 在UV损伤过程中[Ca~(2+)]_i会升高,其随时间波动的振幅和频率会发生变化。 上述结论在UV诱导的细胞DNA损伤与修复的机理研究与应用中具有实际意义。