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生物活性肽生产工艺及其生理活性研究

陈亮  
【摘要】:生物活性肽指能够调节生物机体的生命活动或具有某些生理活性作用的一类肽的总称。这些生物活性肽大多以非活性状态存在于蛋白质长链中,当被酶解成适当的长度时,它们的生理活性才会表现出来。 本文选用四种不同来源的食源性蛋白原料作为复合蛋白原料,通过复合蛋白酶水解和乳杆菌发酵双重作用生产生物活性肽。蛋白原料水解液经真空冷冻干燥制得生物活性肽粉。并对该活性肽粉的理化性质和生理功能进行了详细的研究。 试验采用复合蛋白酶对不同来源的复合蛋白原料进行酶法水解,蛋白原料的高水解度和活性肽功能多样性得到了保证。在温度90℃下对复合蛋白原料进行加热预处理15min后,进行酶法水解操作。经工艺优化和正交试验得到最佳酶解工艺条件:中性蛋白酶:木瓜蛋白酶:凝乳蛋白酶:胰蛋白酶=30%/60%/5%/5%,[E]/[S]=1%,温度60℃,水解时间5h,pH值为7.0。在此最佳酶解工艺条件下,水解度达到24.8%。 利用乳杆菌对酶水解混合液进行发酵处理,水解度进一步提高到33.4%,升幅达34.6%,蛋白水解液的苦味值也从发酵前的1.2下降到0.3,降幅达75%。乳杆菌发酵工艺条件为:乳杆菌培养液接种量为5%,葡萄糖添加量为2%,温度30℃,静置发酵12h。 采用真空冷冻干燥法对蛋白原料水解混合液进行干燥,活性肽的生理活性得到最大程度的保持。活性肽粉为淡黄色粉末,较细腻,具有淡淡大豆清香,基本无苦味。 活性肽粉的氨基酸含量丰富、比例平衡,具有很好的营养价值。经透析试验和质谱分析证明,活性肽粉中多肽主要集中在5KD以下,占蛋白质总量的90%左右,其中3KD以下多肽含量占44%左右。该活性肽生产工艺证明是科学可行的、达到了预期的目的。 经大鼠急性经口毒性试验、大鼠30天喂养试验和遗传毒性试验分析,证明该活性肽在人体推荐用量范围内未发现任何毒副作用;经小鼠体液免疫功能及单


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