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L-色氨酸高产菌的选育及其发酵条件的优化

陈俊峰  
【摘要】: 本文以代谢控制理论为指导,研究了L-色氨酸高产菌的选育及其发酵条件的优化。主要研究内容和结果如下: 1.根据微生物菌株生物合成L-色氨酸代谢途径的的特性,设计了产色氨酸的细菌选择性分离筛选培养基。对从土壤分离得到的832株细菌,通过初筛和复筛,筛选到6株L-色氨酸产生菌株,并对其进行了初步分类鉴定,确定了这6株均为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutanicum)。其中一株编号为JXQ3-28的菌株延滞期短,生长良好,产色氨酸达到0.80g/L。 2.以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutanicum)JXQ3-28为出发菌株,采用NTG、紫外线多次诱变,经摇管初筛、摇瓶复筛、遗传标记验证、单菌落分离和连续传代,定向选育出一株L-色氨酸高产菌株SG-116(Phe~-+Tyr~-+5FT~r+5MT~r+4FP~r+SG~r),其遗传性状稳定。在未经优化的摇瓶发酵条件下,发酵96小时,最高产酸量达7.31g/L。 3.研究了菌株SG-116的摇瓶分批发酵条件。采用单因素、正交设计、均匀设计等实验设计方法,应用DPS数据处理系统获得了该菌株种子培养基与发酵培养基优化配比,并对种子培养条件与发酵条件进行了研究。在优化条件下,菌株SG-116摇瓶分批发酵90h,产L-色氨酸达10.15g/L。


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