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基因插入导致番茄表型变异及其蛋白质组差异分析

薛柯  
【摘要】: 本实验将整合有乙肝表面抗原(HBsAg)基因的樱桃番茄无菌苗,炼苗后移栽到田间种植,通过适当的管理,获得了转基因番茄植株。主要取得了以下进展: 1.通过PCR鉴定,HBsAg基因仍保留在转化植株中,初步说明外源基因HBsAg具有遗传稳定性。 2.经过两年的大田种植后,转基因番茄植株在形态上都表现出与野生番茄植株的显著不同。前者叶片呈深绿色,肥厚似马铃薯叶,叶缘缺刻不明显,裂片少而大,小叶数目少。 3.ELISA检测大田植株叶片蛋白证明外源乙肝表面抗原具有免疫活性。免疫组化结果在细胞学水平进一步证明了这一结论。 4.初步建立了应用13cm pH3-10 IPG干胶条的樱桃番茄双向电泳体系。 5.通过双向电泳技术比较野生型番茄和转基因突变番茄叶片蛋白质组变化情况。分别在野生型和转基因型胶图上检测到699和545个蛋白点,其中有415个点匹配。大量特异蛋白的存在说明转基因叶片蛋白质组产生了变化。


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